目的研究端粒酶SiRNA对端粒酶mRNA的阻抑作用以及对人口腔鳞状细胞癌KB细胞生长的影响作用.方法选取距离端粒酶mRNA起始密码第2 657～2 675核苷酸作为SiRNA的双链序列, 并在两条链的3′端加上"UU"两个核苷酸, 用RT-PCR和端粒重复序列扩增法(TRAP)测定KB细胞转染前后mRNA水平以及端粒酶活性,并测定细胞增殖、细胞周期以及细胞凋亡.结果 SiRNA转染细胞24 h后能非常有效地阻抑端粒酶mRNA的水平,同时端粒酶活性也相应降低,但这种阻抑作用只维持48 h左右,转染后72 h, 端粒酶mRNA和端粒酶活性恢复正常.端粒酶mRNA的阻抑影响细胞的增殖,细胞在转染后的48 h, 增殖率开始下降, 且一直持续到转染后的120 h, 细胞增殖抑制效应与细胞周期的阻滞有关, 但未发现与细胞凋亡有关.结论端粒酶SiRNA能有效地抑制端粒酶mRNA的表达和端粒酶活性,同时抑制细胞增殖,提示端粒酶对于肿瘤细胞的生长是必需的, 开发端粒酶抑制剂作为新的抗肿瘤药物有着广阔的应用前景.
作者：杨志强；陈广胜；陈家坤；吴中亮；雷毅雄
来源：中华口腔医学杂志 2004 年 39卷 5期
