目的 利用AdMaxTM腺病毒载体系统,构建大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)基因重组腺病毒载体,包装重组腺病毒并鉴定.方法 根据Genbank提供的大鼠CGRP序列信息(NM_001033956.1),合成序列全长,PCR方法扩增目的 基因,将CGRP/His基因片段亚克隆至穿梭质粒pDC316,形成重组质粒pDC316-CGRP/His,挑选测序正确的质粒与骨架质粒pBHGloxdelE13cre共转染293A细胞,包装出重组腺病毒Ad-CGRP/His,利用PCR和Western鉴定基因的表达.结果 (1)成功构建pDC316-rCGRP/His重组质粒.(2)包装出表达rCGRP/His的重组腺病毒.结论 成功构建携带大鼠CGRP基因的重组腺病毒载体,并获得表达rCGRP/His的重组腺病毒,为深入研究CGRP基因并开展相关的基因治疗研究奠定基础.
作者:黄泰源;薛涛;张光武
来源:中华临床医师杂志(电子版) 2012 年 06卷 15期