目的：通过细菌内同源重组，制备含绿荧光（GFP）基因的CD腺病毒，初步观察其体外杀瘤作用。方法：先构建含CD基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-CD，与骨架载体pAdEasy-1在细菌内重组为pAd-CD，经293细胞包装为增殖缺陷性腺病毒，体外感染人结肠癌细胞株LoVo，并给予前药5-FC，观察其体外杀瘤效果。结果：pAdTrack-CMV-CD和同源重组的pAd-CD经酶切鉴定正确，pAd-CD转染293细胞，包装扩增腺病毒后，感染LoVo细胞，予5-FC治疗，4d后在荧光显微镜下观察到转染的LoVo和未转染细胞胞均被杀死，并且这种旁观者效应不依赖于细胞间接触。结论：细菌内质粒同源重组法可以高效制备含绿荧光（GFP）基因的CD腺病毒，体外腺病毒介导CD/5-FC可以杀伤肿瘤细胞，其旁观者效应不依赖于细胞间接触。
作者：戴观荣；崔龙；王元和；王强；高军
来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2001 年 8卷 1期
