目的:制备表达人NP9蛋白的复制缺陷型重组腺病毒.方法:酶切pMD18T-NP9质粒获得NP9基因编码区序列并克隆至穿梭载体构建重组pAdTrack-CMV-NP9载体,线性化后与pAdEasy-1共转化BJ5183,通过同源重组得到重组的pAD-NP9病毒载体.将重组腺病毒载体转染HEK293包装细胞制备重组腺病毒.结果:酶切鉴定得到阳性pAD-NP9重组腺病毒载体,该载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装,转染3d后可以观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达并逐渐增多、增强.结论:成功构建了NP9基因的重组腺病毒载体并制备重组腺病毒颗粒,为进一步研究NP9基因的功能及应用NP9进行基因治疗奠定基础.
作者：刘启才；李晓艳；彭燕；李冰
来源：广州医学院学报 2005 年 33卷 2期
