目的 观察细菌生物膜(bacterial biofilms,BBF)在复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液的形成,探讨鲎试验及免疫荧光二重染色结合激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)方法研究细菌生物膜感染的可行性.方法 抽取12例(18耳)复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液分别行细菌培养鉴定、鲎试验检测细菌内毒素、免疫荧光双重染色标记后CLSM观察.结果 所有患者细菌培养鉴定阳性率为22.2％ (4/18)；快速凝胶法鲎试验检测细菌内毒素反应阳性率为72.2％ (13/18)；中耳积液标本行异硫氰酸荧光素标记的刀豆球蛋白(FITC-ConA)及碘化丙啶(PI)双重染色后,CLSM下见大量绿色荧光,代表该处较多多糖基质,其间有橙红色荧光,代表细菌和宿主细胞.其中稀薄、清亮积液标本的橙红色荧光明显较黏稠积液标本的弱.结论 复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液存在细菌生物膜形成,中耳炎反复发作或迁延不愈可能与此有关；本研究建立的鲎试验及免疫荧光二重染色结合CLSM方法是检测细菌内毒素和观察BBF形成有效可行的方法.
作者：杨名保；武勇进；郑加创；赵海亮；蓝建平；邱书奇
来源：中华临床医师杂志（电子版） 2012 年 6卷 18期
