目的探讨C-myc与β-Catenin介导的肺腺癌A549/DDP的耐药相关性。方法 MTT细胞毒实验比较A549与A549/DDP细胞对顺铂的敏感性;Western blot检测在顺铂作用前、后β-catenin及C-myc在肺腺癌A549及A549/DDP中的蛋白表达及免疫荧光定位;流式细胞仪检测不同剂量的顺铂作用下两株细胞以及A549/DDP转染C-myc siRNA前后的凋亡和周期变化。结果 MTT细胞毒实验结果显示顺铂对A549和A549/DDP细胞的IC50值分别为(5.769±0.24)μmol/L和(28.373±0.96)μmol/L,与A549细胞比较. A549/DDP顺铂耐药4.92倍。 Western blot 结果显示β-Catenin 及C-myc蛋白在A549/DDP细胞的表达较A549高,顺铂作用48 h后A549细胞的β-catenin及C-myc表达较顺铂作用前下调( P=0.007), A549/DDP细胞的β-catenin及C-myc表达较顺铂作用前上调( P=0.006);免疫荧光定位结果显示顺铂作用48 h后A549及A549/DDP细胞的β-Catenin由膜/质/核表达转为质/核表达,C-myc表达由浆/核表达转为核表达。流式结果显示随着顺铂剂量的增加,细胞凋亡率成剂量依赖性增加。 A549/DDP中转染C-myc siRNA 48 h后引起细胞S期阻滞,G0/G1期细胞积聚,凋亡率增加(P=0.013),IC50值明显下降(P=0.009)。结论β-catenin的下游靶基因C-myc在调节A549/DD
作者:潘泳岐;高原;郝凤霞;谢玲玲;李庆昌;邱雪杉;王恩华
来源:中华临床医师杂志(电子版) 2013 年 12期