目的 观察重金属化合物硫酸镉(CdSO4)在体外对人羊膜FL/P450 1A1细胞内P450 1A1 DNA序列的改变作用,了解镉化合物对肺癌易感基因的影响 .方法利用不同剂量的CdSO4处理FL/P450 1A1细胞,其半数抑制浓度(IC50)为24.55 mg/ml.以1/4 IC50终浓度CdSO4处理FL/P450 1A1细胞48 h后提取细胞pREP 9/ P450 1A1质粒.由于pREP 9缺少通用序列,BamHI酶切,低熔点琼脂糖电泳分离P450 1A1 cD NA片段.BamHI酶切pGEM～3Zf(+),CIP处理,并与2倍摩尔P450 1A1 cDNA片段混合,乙醇沉淀,沉淀物加入18 μl TE,加2 μl 10倍连接酶缓冲液,混匀,加10 U T4 DNA连接酶,混匀,12 ℃保温16～20 h.凝胶电泳分析连接结果.鉴定合格连接物转化DH5 α菌,X- gal喷洒对重组子进行蓝/白颜色筛选.选择含重组子的宿主菌进行P450 1A1 cDNA测序. 结果 在体外,CdSO4未引起FL/P450 1A1 cDNA序列改变 .结论 CdSO4对FL/P450 1A1细胞中肺癌易感基因P450 1A1 cDNA没有影响.
作者：陆敦；印木泉
来源：中华劳动卫生职业病杂志 2000 年 18卷 4期
