目的:探讨镉诱导小鼠精母细胞(GC-2 spd)凋亡的作用机制。方法:于2021年3月,分别用5和10 μmol/L氯化镉(CdCl
2)染毒GC-2 spd细胞24 h,分别为CdCl
2 5 μmol/L染毒组(CdCl
2低剂量组)和CdCl
2 10 μmol/L染毒组(CdCl
2高剂量组),以未染毒的GC-2 spd细胞作为对照组。采用Mito-Track Red CMXRos线粒体荧光探针染色细胞检测线粒体形态,流式细胞术结合JC-1荧光探针检测线粒体膜电位的变化;使用细胞线粒体分离试剂盒和RIPA裂解液分别提取GC-2 spd细胞的线粒体蛋白、细胞浆蛋白和细胞总蛋白,Western blot检测线粒体稳态调节蛋白[分裂蛋白(FIS1)和融合蛋白(OPA1)]及细胞凋亡相关蛋白(Cytochrome c和cleaved Caspase-3)的表达。
结果:与对照组细胞比较,CdCl
2低剂量组和高剂量组细胞中JC-1红色/绿色荧光信号相对比值均明显降低(0.740±0.071、0.570±0.028),差异有统计学意义(
P=0.017、0.004);线粒体形态由长管状变为点状,含点状线粒体的细胞比例明显升高(45.1
作者:黄鼎宇;马兰;吕灵璐;胡恋;张玲;柳赟昊
来源:中华劳动卫生职业病杂志 2022 年 40卷 11期