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目的 探讨软脂酸(PA)诱导的血管内皮细胞凋亡中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的作用.方法 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)贴壁培养后分为对照组;PA(200、400、800 μmol/L)浓度组(分别为PA200组、PA400组、PA800组);NADPH氧化酶抑制剂apocynin(50、100、200 mol/L)干预组(分别为apo50+PA400组、apo100+PA400组、apo200+PA400组).采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;提取细胞蛋白,采用Western blot技术检测NADPH氧化酶亚基p47phox蛋白表达的水平.倒置共聚焦荧光显微镜检测活性氧的产生.结果 PA呈浓度依赖性诱导HUVEC凋亡;与对照组比较,PA400、PA800组HUVEC凋亡率明显升高,P47phox蛋白表达明显增强(P<0.05),PA400组活性氧产生明显升高(P<0.05);与PA400组比较,apo100+PA400组、apo200+ PA400组HUVEC凋亡率明显降低,p47phox蛋白表达明显减弱,活性氧产生明显降低(P<0.05).结论PA呈浓度依赖性诱导HUVEC凋亡,apocynin能部分抑制PA的上述作用,其机制与下调NADPH氧化酶亚基p47phox蛋白表达及活性氧产生有关.

作者:江海龙;苏海明;甘继宏;戴作军;王海涛;葛冬云

来源:中华老年心脑血管病杂志 2012 年 14卷 4期

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作者:
江海龙;苏海明;甘继宏;戴作军;王海涛;葛冬云
来源:
中华老年心脑血管病杂志 2012 年 14卷 4期
标签:
棕榈酸 NADP 内皮细胞 细胞凋亡 氧化性应激 活性氧
目的 探讨软脂酸(PA)诱导的血管内皮细胞凋亡中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的作用.方法 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)贴壁培养后分为对照组;PA(200、400、800 μmol/L)浓度组(分别为PA200组、PA400组、PA800组);NADPH氧化酶抑制剂apocynin(50、100、200 mol/L)干预组(分别为apo50+PA400组、apo100+PA400组、apo200+PA400组).采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;提取细胞蛋白,采用Western blot技术检测NADPH氧化酶亚基p47phox蛋白表达的水平.倒置共聚焦荧光显微镜检测活性氧的产生.结果 PA呈浓度依赖性诱导HUVEC凋亡;与对照组比较,PA400、PA800组HUVEC凋亡率明显升高,P47phox蛋白表达明显增强(P<0.05),PA400组活性氧产生明显升高(P<0.05);与PA400组比较,apo100+PA400组、apo200+ PA400组HUVEC凋亡率明显降低,p47phox蛋白表达明显减弱,活性氧产生明显降低(P<0.05).结论PA呈浓度依赖性诱导HUVEC凋亡,apocynin能部分抑制PA的上述作用,其机制与下调NADPH氧化酶亚基p47phox蛋白表达及活性氧产生有关.