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目的 探讨芹菜素对棕榈酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用及其作用机制.方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为对照组、棕榈酸组、芹菜素组、棕榈酸+芹菜素组、c-Jun氨基末端激酶(JNK)激动剂组、JNK激动剂组+棕榈酸组,JNK激动剂+棕榈酸+芹菜素组.对照组加入0.5%二甲基亚砜(DMSO);棕榈酸组加入500μmol/L棕榈酸;芹菜素组加入20μmol/L芹菜素;棕榈酸+芹菜素组先加入20μmol/L芹菜素处理H9c2细胞2 h,之后再加入500μmol/L棕榈酸;JNK激动剂+棕榈酸+芹菜素组是在棕榈酸+芹菜素组的基础之上加用20 mg/kg JNK激动剂处理;JNK激动剂组只用20 mg/kg JNK激动剂处理;JNK激动剂+棕榈酸组用20 mg/kg JNK激动剂和500μmol/L棕榈酸共同刺激.经上述处理24 h后,光学显微镜下观察细胞形态;原位末端标记法(TUNEL)染色和分裂化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(C-caspase3)免疫荧光观察细胞凋亡;免疫印记检测凋亡相关蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路;RT-PCR检测超氧化物歧化酶(SOD1、2、3)的表达;DCFH-DA荧光探针检测活性氧簇(ROS)水平;氧化应激相关试剂盒检测丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性.结果光学显微镜下观察和TUNEL染色显示,相比对照组,棕榈酸显著诱导H9c2细胞凋亡,而芹菜素预处

作者:张楠;廖海含;陈思;杨晶晶;李文静;邓伟;唐其柱

来源:中华生物医学工程杂志 2018 年 24卷 3期

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作者:
张楠;廖海含;陈思;杨晶晶;李文静;邓伟;唐其柱
来源:
中华生物医学工程杂志 2018 年 24卷 3期
标签:
芹菜素 棕榈酸 细胞凋亡 氧化性应激 c-Jun氨基末端激酶 H9c2
目的 探讨芹菜素对棕榈酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用及其作用机制.方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为对照组、棕榈酸组、芹菜素组、棕榈酸+芹菜素组、c-Jun氨基末端激酶(JNK)激动剂组、JNK激动剂组+棕榈酸组,JNK激动剂+棕榈酸+芹菜素组.对照组加入0.5%二甲基亚砜(DMSO);棕榈酸组加入500μmol/L棕榈酸;芹菜素组加入20μmol/L芹菜素;棕榈酸+芹菜素组先加入20μmol/L芹菜素处理H9c2细胞2 h,之后再加入500μmol/L棕榈酸;JNK激动剂+棕榈酸+芹菜素组是在棕榈酸+芹菜素组的基础之上加用20 mg/kg JNK激动剂处理;JNK激动剂组只用20 mg/kg JNK激动剂处理;JNK激动剂+棕榈酸组用20 mg/kg JNK激动剂和500μmol/L棕榈酸共同刺激.经上述处理24 h后,光学显微镜下观察细胞形态;原位末端标记法(TUNEL)染色和分裂化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(C-caspase3)免疫荧光观察细胞凋亡;免疫印记检测凋亡相关蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路;RT-PCR检测超氧化物歧化酶(SOD1、2、3)的表达;DCFH-DA荧光探针检测活性氧簇(ROS)水平;氧化应激相关试剂盒检测丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性.结果光学显微镜下观察和TUNEL染色显示,相比对照组,棕榈酸显著诱导H9c2细胞凋亡,而芹菜素预处