目的 通过构建miR-15b过表达及低表达腺病毒载体,探索其对心肌细胞凋亡的影响.方法 体外分离培养SD乳鼠原代心肌细胞,建立模拟心肌缺氧/复氧(H/R)模型.实验随机分为对照组、H/R组、miR-15b过表达组(AdmiR-15b组)、miR-15b低表达组(AdasmiR-15b组)、miR-15b阴性对照组(AdmiR-NC组).Annexin V-异硫氰酸荧光素标记/碘化丙啶标记细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡.Taqman实时定量PCR法精确定量miR-15b表达水平.结果 细胞转染效率为100％.与AdmiR-NC组比较,AdmiR-15b组miR-15b表达上调＞9倍,而AdasmiR-15b组表达下调50％(P＜0.01).与对照组比较,H/R组、AdmiR-NC组细胞凋亡率明显升高(P＜0.01)；与AdmiR-NC组比较,AdmiR-15b组细胞凋亡率明显升高,AdasmiR- 15b组明显降低(P＜0.01).结论 在心肌细胞miR-15b为重要的凋亡调节因子,阻断miR-15b表达有可能减少心肌细胞凋亡,从而保护心肌减轻再灌注损伤.
作者：刘丽凤；刘秀华；白静；陈杰；王一茹；王禹
来源：中华老年心脑血管病杂志 2012 年 14卷 5期
