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目的 研究微小(microRNA,miR)-155对心肌细胞肥大的影响及对钙调磷酸酶(CaN-β)和活化T细胞核因子4(NFAT 4)表达的调控作用.方法 培养大鼠心肌细胞H9C2(2-1),血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导心肌细胞肥大,脂质体转染法将miR-155模拟物和miR-155抑制物转染入心肌细胞.分为对照组、AngⅡ组、mimics组、inhibitors 组、AngⅡ+mimics组和AngⅡ+inhibitors组.实时荧光定量PCR检测心肌细胞miR-155的表达.逆转录PCR法检测心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)和CaN-β mRNA表达水平.Western blot法检测CaN-β和NFAT-4蛋白表达水平.结果 与AngⅡ组比较,AngⅡ+mimics组ANP、β-MHC、心肌细胞表面积、CaN-βmRNA和蛋白表达及NFAT-4蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CaN-β可能为miR-155的作用靶点,miR-155可通过负性调控CaN-β和NFAT-4的表达,减少心肌细胞ANP和β-MHC表达,抑制心肌细胞肥大.

作者:杨勇;周勇;罗涛;谢华强;佟新竹;吴瑞霞

来源:中华老年心脑血管病杂志 2015 年 17卷 1期

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作者:
杨勇;周勇;罗涛;谢华强;佟新竹;吴瑞霞
来源:
中华老年心脑血管病杂志 2015 年 17卷 1期
标签:
微RNAs 肌细胞,心脏 NFATC转录因子类 血管紧张素Ⅱ 脂质体 转染 microRNAs myocytes,cardiac NFATC transcription factors angiotensin Ⅱ liposomes transfection
目的 研究微小(microRNA,miR)-155对心肌细胞肥大的影响及对钙调磷酸酶(CaN-β)和活化T细胞核因子4(NFAT 4)表达的调控作用.方法 培养大鼠心肌细胞H9C2(2-1),血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导心肌细胞肥大,脂质体转染法将miR-155模拟物和miR-155抑制物转染入心肌细胞.分为对照组、AngⅡ组、mimics组、inhibitors 组、AngⅡ+mimics组和AngⅡ+inhibitors组.实时荧光定量PCR检测心肌细胞miR-155的表达.逆转录PCR法检测心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)和CaN-β mRNA表达水平.Western blot法检测CaN-β和NFAT-4蛋白表达水平.结果 与AngⅡ组比较,AngⅡ+mimics组ANP、β-MHC、心肌细胞表面积、CaN-βmRNA和蛋白表达及NFAT-4蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CaN-β可能为miR-155的作用靶点,miR-155可通过负性调控CaN-β和NFAT-4的表达,减少心肌细胞ANP和β-MHC表达,抑制心肌细胞肥大.