目的 采用RNA干扰技术选择性下调大鼠心肌细胞中转录因子Pax-8的表达,引起线粒体功能的变化,借此探讨线粒体对心肌细胞凋亡的影响.方法 将H9C2(2-1)大鼠胚胎心肌细胞分为3组:实验组[针对Pax-8基因的小干扰RNA(Pax-8 siRNA)组],阴性对照组[非特异性siRNA(NC siRNA)组]和空白对照组(BC siRNA组).荧光分光光度法检测半胱天冬酶(caspase-3)活性以反映细胞凋亡,RT-PCR测定B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl2)和其同源类似物Bax的mRNA表达,Western blot测定Bcl2、Bax和胞浆细胞色素C(Cyto)的蛋白表达,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(△ψm,用JC-1单体/聚合物比值来衡量线粒体去极化的比例,比值越大,△ψm越低).结果 Pax-8 siRNA组心肌细胞caspase-3活性(0.167 ±0.012)明显高于NC siRNA组(0.075 ±0.021)和BC siRNA组(0.072 ±0.019),P均＜0.05.Pax-8 siRNA组Bcl2 mRNA和蛋白的表达水平(分别为0.61 ±0.06和0.94±0.11)明显低于NC siRNA组(分别为0.90±0.070和1.39±0.15)和BC siRNA组(分别为0.94±0.09和1.49 ±0.20),P均＜0.05.Pax-8 siRNA组Bax mRNA和蛋白表达水平(分别为1.05±0.10和1.25±0.12)明显高于NC siRNA组(分别为0.72 ±0.03和0.99 ±0.12)和BC siRNA组(分别为0.64±0.03和0.9

作者：戴晓春；周希；黄晓燕；王良国；林素；杨德业

来源：中华心血管病杂志 2013 年 41卷 1期