目的 探讨小窝(caveolae)对雌激素通过G蛋白偶联雌激素受体(GPER)调控小鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响.方法 当细胞融合度达到80％～90％时,选取内皮细胞分为对照1组、DMSO组、雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组(n=5),其中雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组按浓度梯度加入雌二醇(10、50、100 nmol/L),对照1组不予任何处理,DMSO组加入50 μl DMSO培养.另选取内皮细胞分为对照2组(未作任何处理)、阴性对照1组[加入小窝蛋白1(Cav-1)阴性对照干扰RNA]、Cav-1敲减组(加入Cav-1干扰RNA);选取部分内皮细胞设对照3组(未作任何处理)、阴性对照2组(加入GPER阴性对照干扰RNA)、GPER敲减组(加入GPER干扰RNA).检测Cav-1、GPER、eNOS、磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达.结果 与对照1组比较,雌二醇3组p-eNOS蛋白表达明显增加(0.47±0.07 vs 0.20±0.04,P＜0.05).对照2组、阴性对照1组、Cav-1敲减组GPER、eNOS、Cav-1蛋白表达比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与对照2组比较,Cav-1敲减组GPER、eNOS、Cav-1蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01).对照3组、阴性对照2组、GPER敲减组eNOS、p-eNOS表达比较,无统计学差异(P＞0.05).与对照3组比较,GPER敲减组GPER蛋白表达明显降低(0.56±0.22vs2.40±0.65,P＜0.05).

作者：边慧敏；贾青；张华；赵颖馨；孙尚文；刘振东；柴强

来源：中华老年心脑血管病杂志 2021 年 23卷 10期