目的 探讨促甲状腺激素(TSH)是否通过激活环腺苷酸-蛋白激酶A(eAMP-PKA)通路,促进3T3-L1脂肪细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α),进一步影响脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的基因及蛋白的表达和转位,参与脂肪细胞胰岛素抵抗发生的慢性非特异性炎症过程.方法 体外诱导3T3-L1前脂肪细胞成为成熟脂肪细胞.采用牛促甲状腺素(TSH)刺激脂肪细胞,并分别予以腺苷酸环化酶激活剂(Forskolin)、蛋白激酶A抑制剂(H89)、雷帕霉素(Rapamycin)干预,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养基TNF-α水平,实时荧光定量聚合酶链反应(Real time PCR)法检测细胞GLUT4 mRNA表达水平,Western blotting方法检测细胞GLUT4总蛋白及膜蛋白表达变化. 结果 随着TSH刺激时间的延长和刺激浓度的增加,3T3-L1脂肪细胞培养基内TNF-α浓度呈上升趋势(P＜0.05)；Forskolin组与牛TSH组(0.04 μmmol/L)比较,TNF-α水平变化差异无统计学意义[(481.9±28.4)ng/L比(522.7±36.2)ng/L,P＞0.05]；与空白对照组比较,H89干预组(10 μmmol/L) TNF-α水平无明显升高[(326.7±43.2)ng/L比(341.9±12.0) ng/L,P＞0.05]；随着TSH刺激浓度的增加(0.0004、0.0040和0.0400 μmol/L),与对照组比较GLUT4 mRNA表达(0.25±0.11、0.10±0.03、0.04±0.02比0.40±0.13)、总

作者：张雅静；赵伟；张宏；吴晓明；刘佳

来源：中华老年医学杂志 2013 年 32卷 2期