目的 构建表达人类小分子热休克蛋白22(HSP22)的转基因小鼠模型. 方法 构建携带人类HSP22基因的pCAGGS-H A-Wt HSP22转基因表达载体,用Sal Ⅰ、HindⅢ和BsaⅪ3个核酸内切酶对pCAGGS-HA-wt HSP22进行酶切得到线性化目的片段,通过微纤维注射技术进行受精卵原核注射,通过PCR结合测序技术对仔鼠进行鉴定,应用Western Blot技术进行外源性HSP22蛋白表达的分析. 结果 获得4只携带人类HSP22基因的转基因首建鼠,分别为Tg646、Tg648、Tg649和Tg661系首建鼠,Tg661系首建鼠不表达人类HSP22蛋白,Tg646、Tg648、Tg649系首建鼠表达人类HPP22蛋白,可用于下一步研究. 结论 获得了表达人类HSP22蛋白的转基因小鼠模型,为开展HSP22基因功能研究奠定了基础.
作者:张付峰;卢晓琴;周亚芳;沈璐;江泓;严新翔;唐北沙
来源:中华老年医学杂志 2013 年 32卷 3期