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目的 探讨细胞衰老在胃黏膜衰老相关性病变中的作用. 方法 采用200 μmol/LH2O2诱导胃黏膜上皮细胞GES-1衰老,观察细胞生长曲线,通过SA-β-Gal染色、Western blot检测p53和p16INK4a蛋白表达观察细胞衰老情况;Real-time PCR检测衰老GES-1细胞衰老相关分泌表型(SASP)相关因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素β(TGF-β)、干扰素-γ(IFN-γ)和血管表皮生长因子(VEGF A) mRNA表达,并收集细胞条件培养液,ELISA方法检测IL-1β、IL-6、IL-8、TGF-β、IFN-γ和VEGF表达. 结果 200 μmol/L H2O2处理组GES-1细胞在3d后生长增殖停滞,第10天时细胞变大变平、SA-β-Gal染色增加(P<0.001)、p16INK4a和p53蛋白表达水平明显增加,证实H2O2成功诱导GES-1细胞衰老.和对照组比,衰老GES-1细胞中SASP相关因子IL-1β、IL-6、IL-8、TGF-β、IFN-7的mRNA水平升高(t=2.94、3.38、3.15、3.64、2.97,P=0.015、0.000、0.000、0.000、0.000),VEGF-A的mRNA水平明显降低(t=2.31,P=0.20和对照组);衰老GES-1细胞条件培养液中IL-1β、IL-6、IL-8、TGF-β1和IFN-γ浓度分别是(3.12±0.21)μg/L、(4.26±0.15)μg/L、(3.37±0.14)μg/L、(5.34±0.19)μg/L、(2.90±0.47)μg/L,高于阴性对照组(P<0.001),而VEGF浓

作者:徐海莉;王静云;陆文全;姚婷婷;吕帅;李昕;宁寒冰

来源:中华老年医学杂志 2018 年 37卷 5期

知识库介绍

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作者:
徐海莉;王静云;陆文全;姚婷婷;吕帅;李昕;宁寒冰
来源:
中华老年医学杂志 2018 年 37卷 5期
标签:
胃黏膜 上皮细胞 细胞衰老 衰老相关分泌表型 Gastric mucosa Epithelial cells Cell aging Senescence-associated secretory phenotype
目的 探讨细胞衰老在胃黏膜衰老相关性病变中的作用. 方法 采用200 μmol/LH2O2诱导胃黏膜上皮细胞GES-1衰老,观察细胞生长曲线,通过SA-β-Gal染色、Western blot检测p53和p16INK4a蛋白表达观察细胞衰老情况;Real-time PCR检测衰老GES-1细胞衰老相关分泌表型(SASP)相关因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素β(TGF-β)、干扰素-γ(IFN-γ)和血管表皮生长因子(VEGF A) mRNA表达,并收集细胞条件培养液,ELISA方法检测IL-1β、IL-6、IL-8、TGF-β、IFN-γ和VEGF表达. 结果 200 μmol/L H2O2处理组GES-1细胞在3d后生长增殖停滞,第10天时细胞变大变平、SA-β-Gal染色增加(P<0.001)、p16INK4a和p53蛋白表达水平明显增加,证实H2O2成功诱导GES-1细胞衰老.和对照组比,衰老GES-1细胞中SASP相关因子IL-1β、IL-6、IL-8、TGF-β、IFN-7的mRNA水平升高(t=2.94、3.38、3.15、3.64、2.97,P=0.015、0.000、0.000、0.000、0.000),VEGF-A的mRNA水平明显降低(t=2.31,P=0.20和对照组);衰老GES-1细胞条件培养液中IL-1β、IL-6、IL-8、TGF-β1和IFN-γ浓度分别是(3.12±0.21)μg/L、(4.26±0.15)μg/L、(3.37±0.14)μg/L、(5.34±0.19)μg/L、(2.90±0.47)μg/L,高于阴性对照组(P<0.001),而VEGF浓