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目的 探讨胃癌衰老细胞相关分泌表型条件培养基(SASP-CM)对人胃癌细胞系BGC823增殖能力的影响.方法 取BGC823细胞分为3组:胃癌SASP-CM组、正常肿瘤细胞条件培养基(CTR-CM)组和正常培养基(NOR-CM)组.利用紫杉醇(PTX)处理BGC823细胞构建衰老细胞模型并制备SASP-CM.使用β半乳糖苷酶染色验证衰老细胞模型的建立;酶联免疫吸附实验检测SASP-CM中主要的衰老细胞相关分泌表型(SASP)因子的浓度;CCK-8法及细胞克隆形成实验检测SASP-CM对BGC823细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 35 nmol/L PTX诱导BGC823细胞72 h可建立稳定的细胞衰老模型,此条件下衰老细胞比例最高,为(66.95±3.54)%.SASP-CM中主要的SASP因子白细胞介素(IL)-6、IL-8、CXC趋化因子配体1(CXCL1)、CC趋化因子配体2(CCL2)、γ干扰素(INF-γ)的浓度均高于CTR-CM(P均<0.01).培养48、72、96 h时SASP-CM组细胞的增殖活性均高于CTR-CM组和NOR-CM组(P均<0.05).SASP-CM组细胞的相对克隆形成率高于CTR-CM组(P<0.01)和NOR-CM组(P<0.05).SASP-CM组的S期细胞比例均高于CTR-CM组和NOR-CM组(P均<0.01),各组间细胞凋亡率差异无统计学意义.结论 胃癌SASP-CM促进BGC823细胞增殖.

作者:王瑜;朱振新;唐渊;冯丹;张鑫;王长明;蔡清萍

来源:第二军医大学学报 2017 年 38卷 12期

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作者:
王瑜;朱振新;唐渊;冯丹;张鑫;王长明;蔡清萍
来源:
第二军医大学学报 2017 年 38卷 12期
标签:
胃癌 细胞衰老 衰老相关分泌表型 紫杉醇 细胞增殖 gastric carcinoma cell senescence senescence-associated secretory phenotype taxol cell proliferation
目的 探讨胃癌衰老细胞相关分泌表型条件培养基(SASP-CM)对人胃癌细胞系BGC823增殖能力的影响.方法 取BGC823细胞分为3组:胃癌SASP-CM组、正常肿瘤细胞条件培养基(CTR-CM)组和正常培养基(NOR-CM)组.利用紫杉醇(PTX)处理BGC823细胞构建衰老细胞模型并制备SASP-CM.使用β半乳糖苷酶染色验证衰老细胞模型的建立;酶联免疫吸附实验检测SASP-CM中主要的衰老细胞相关分泌表型(SASP)因子的浓度;CCK-8法及细胞克隆形成实验检测SASP-CM对BGC823细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 35 nmol/L PTX诱导BGC823细胞72 h可建立稳定的细胞衰老模型,此条件下衰老细胞比例最高,为(66.95±3.54)%.SASP-CM中主要的SASP因子白细胞介素(IL)-6、IL-8、CXC趋化因子配体1(CXCL1)、CC趋化因子配体2(CCL2)、γ干扰素(INF-γ)的浓度均高于CTR-CM(P均<0.01).培养48、72、96 h时SASP-CM组细胞的增殖活性均高于CTR-CM组和NOR-CM组(P均<0.05).SASP-CM组细胞的相对克隆形成率高于CTR-CM组(P<0.01)和NOR-CM组(P<0.05).SASP-CM组的S期细胞比例均高于CTR-CM组和NOR-CM组(P均<0.01),各组间细胞凋亡率差异无统计学意义.结论 胃癌SASP-CM促进BGC823细胞增殖.