目的 应用基因工程技术,在昆虫细胞中表达汉坦病毒(HV)S基因,表达产物作为诊断抗原,用于检测血清中抗HV特异性抗体IgG.方法 PCR扩增HV-Z10株N蛋白(NP)编码基因,基因工程方法构建NP编码基因昆虫表达系统rBAC-Z10S-TN.间接荧光法了解重组NP(rNP)表达及与特异性免疫反应情况,SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况.建立免疫印迹法检测肾综合征出血热(HFRS)患者血清样品,并与常规间接免疫荧光法进行比较.结果 rBAC-Z10S-TN高效表达rNP,SDS-PAGE显示rNP的蛋白表达带,此抗原仅与HFRS患者血清起反应.经双盲试验,两法检测血清143份,HFRS阳性符合率为97.67%.结论 成功构建了HV-Z10株NP编码基因高效真核表达系统.所建立的免疫印迹法可作为HFRS简便、安全、敏感、特异的血清学诊断新方法.
作者:姚苹苹;徐芳;孙一晟;杨章女;张云;岳明;朱函坪
来源:中华流行病学杂志 2017 年 38卷 4期