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目的 研究结核分枝杆菌抗原Rv0585c的抗原表位及其免疫原性,为结核病特异免疫诊断技术和疫苗的研发提供基础.方法 利用生物信息学TE-predict和IEDB人T细胞抗原表位预测软件进行结核分枝杆菌抗原Rv0585c的人T细胞抗原表位预测,根据预测结果,合成表位多肽,用ELISpot试验检测预测表位在临床结核病患者中的免疫反应性.分别采用高、低剂量(100 μg/只和50 μg/只)的Rv0585c抗原表位多肽、同时以高、低剂量(50 μg/只和20 μg/只)的Ag85B蛋白抗原为对照,对随机分组的BALB/c小鼠进行免疫.利用ELISA方法检测IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的水平.结果 经生物信息学技术预测到Rv0585c 66个人T细胞抗原表位,选取合成了表位分布集中的抗原表位多肽9条.人群ELISpot试验筛选出3条阳性人T细胞表位多肽:P10110、P10112、P10117,用于肺结核检测的灵敏度分别为14.00%、12.00%和6.00%,特异度分别为100.00%、100.00%和97.96%;联合用于肺结核检测的灵敏度和特异度分别为22.00%和97.96%.动物免疫试验结果显示,P10110多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10,P10112多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2和IL-10,均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.001).结论 Rv0585c蛋白及其T细

作者:王雪枝;陈杏;李雨晴;肖彤洋;蒋毅;李马超;刘海灿;万康林

来源:中华流行病学杂志 2017 年 38卷 5期

知识库介绍

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王雪枝;陈杏;李雨晴;肖彤洋;蒋毅;李马超;刘海灿;万康林
来源:
中华流行病学杂志 2017 年 38卷 5期
标签:
结核分枝杆菌 Rv0585c 人T细胞抗原表位 免疫原性 细胞因子 Mycobacterium tuberculosis Rv0585c Human T cell epitopes Immunogenicity Cytokine
目的 研究结核分枝杆菌抗原Rv0585c的抗原表位及其免疫原性,为结核病特异免疫诊断技术和疫苗的研发提供基础.方法 利用生物信息学TE-predict和IEDB人T细胞抗原表位预测软件进行结核分枝杆菌抗原Rv0585c的人T细胞抗原表位预测,根据预测结果,合成表位多肽,用ELISpot试验检测预测表位在临床结核病患者中的免疫反应性.分别采用高、低剂量(100 μg/只和50 μg/只)的Rv0585c抗原表位多肽、同时以高、低剂量(50 μg/只和20 μg/只)的Ag85B蛋白抗原为对照,对随机分组的BALB/c小鼠进行免疫.利用ELISA方法检测IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的水平.结果 经生物信息学技术预测到Rv0585c 66个人T细胞抗原表位,选取合成了表位分布集中的抗原表位多肽9条.人群ELISpot试验筛选出3条阳性人T细胞表位多肽:P10110、P10112、P10117,用于肺结核检测的灵敏度分别为14.00%、12.00%和6.00%,特异度分别为100.00%、100.00%和97.96%;联合用于肺结核检测的灵敏度和特异度分别为22.00%和97.96%.动物免疫试验结果显示,P10110多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10,P10112多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2和IL-10,均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.001).结论 Rv0585c蛋白及其T细