目的 构建Livin靶向小干扰RNA(siRNA)重组表达载体,观察其对前列腺癌PC3细胞凋亡和增殖等生物学特性的影响. 方法 2009年1月至2012年1月,构建针对Livin基因的siRNA真核表达载体U6/GFP/Neo-Livin并转染前列腺癌PC3细胞.实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测转染后Livin基因mRNA和蛋白的表达情况,MTT法检测对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测转染后细胞的凋亡效应以及对细胞周期的影响,克隆形成实验观察对细胞体外克隆形成能力的改变,体内成瘤实验比较细胞在裸鼠体内成瘤性的变化. 结果 Livin靶向siRNA重组表达载体转染PC3细胞后,与对照组相比,实验组细胞内Livin mRNA和蛋白的表达水平分别下调至(31.55±3.92)％、(0.37±0.02)％(P＜0.01)；与对照组相比,PC3细胞增殖受到显著抑制(P＜0.01)；细胞凋亡率增到(26.5±3.3)％(P＜0.01)；Caspase3活性增至0.079±0.017 (P＜0.05),体外克隆形成率降至(34.8±3.5)％(P＜0.01).实验组和对照组荷瘤裸鼠的成瘤体积分别为(1.79±0.07)、(4.40±0.06) cm3(p＜0.01). 结论 靶向Livin基因的siRNA干扰了前列腺癌PC3细胞中Livin基因的表达,抑制了细胞增殖并诱导其凋亡,延缓了肿瘤细胞的生长.
作者：谢晓强；章振保；杨恩明；李显文；李宗金；徐勇
来源：中华泌尿外科杂志 2013 年 34卷 11期
