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目的 评价缺氧复氧对大鼠离体肾小管上皮细胞凋亡及缝隙连接的影响.方法 肾小管上皮细胞以1×105个/ml密度接种于6孔培养板(2 ml/孔),采用随机数字表法分为2组(n=18):正常对照组(C组)和缺氧复氧组(H/R组).C组细胞置于常氧恒温CO2细胞培养箱28 h,H/R组细胞置于厌氧培养罐中缺氧培养24 h后,取出置于常氧恒温CO2细胞培养箱进行复氧培养4h.使用Hoechst33258染色法及流式细胞术检测细胞凋亡率;采用特异的“细胞接种荧光示踪法”检测细胞缝隙连接功能,Western blot法检测缝隙连接蛋白Connexin 43(Cx43)表达水平.结果 与C组比较,H/R组细胞凋亡率升高,细胞缝隙连接功能及Cx43蛋白表达降低(P<0.05).结论 缺氧复氧通过破坏细胞缝隙连接促进大鼠肾小管上皮细胞凋亡.

作者:罗晨芳;原冬冬;蔡珺;黑子清

来源:中华麻醉学杂志 2014 年 34卷 1期

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作者:
罗晨芳;原冬冬;蔡珺;黑子清
来源:
中华麻醉学杂志 2014 年 34卷 1期
标签:
细胞低氧 氧 肾小管 上皮细胞 细胞凋亡 连接蛋白43 Cell hypoxia Oxygen Kidney tubules Epithelial cells Apoptosis Connexin 43
目的 评价缺氧复氧对大鼠离体肾小管上皮细胞凋亡及缝隙连接的影响.方法 肾小管上皮细胞以1×105个/ml密度接种于6孔培养板(2 ml/孔),采用随机数字表法分为2组(n=18):正常对照组(C组)和缺氧复氧组(H/R组).C组细胞置于常氧恒温CO2细胞培养箱28 h,H/R组细胞置于厌氧培养罐中缺氧培养24 h后,取出置于常氧恒温CO2细胞培养箱进行复氧培养4h.使用Hoechst33258染色法及流式细胞术检测细胞凋亡率;采用特异的“细胞接种荧光示踪法”检测细胞缝隙连接功能,Western blot法检测缝隙连接蛋白Connexin 43(Cx43)表达水平.结果 与C组比较,H/R组细胞凋亡率升高,细胞缝隙连接功能及Cx43蛋白表达降低(P<0.05).结论 缺氧复氧通过破坏细胞缝隙连接促进大鼠肾小管上皮细胞凋亡.