目的:评价NF?E2相关因子2( Nrf2)∕抗氧化反应序列原件( ARE)信号通路在氢抑制LPS致巨噬细胞炎症因子释放中的作用。方法小鼠巨噬细胞株RAW264.7接种于6孔培养板(2×106个∕孔),采用随机数字表法将其分为4组( n=24):对照组( C组)、LPS组、富氢液+LPS组( LPS+H2组)和Nrf2小干扰RNA( siRNA)+ LPS+富氢液组( siRNA+LPS+H2组)。 LPS组加入LPS 1μg∕ml;LPS+H2组加入LPS 1μg∕ml,培养基更换为0.6 mmol∕L的富氢液培养基;siRNA+LPS+H2组将Nrf2?siRN成功转染至细胞后,继续培养24 h,加入LPS 1μg∕ml,培养基更换为0.6 mmol∕L的富氢液培养基。于孵育24 h时,收集上清液,采用比色法测定LDH活性,采用ELISA法检测TNF?α、IL?1β、高迁移率族蛋白B1( HMGB1)和IL?6的浓度;收集细胞,采用MTT法测定细胞增殖水平,采用Western blot法检测Nrf2和血红素氧合酶?1( HO?1)的表达水平。结果与C组比较,LPS组和siRNA+ LPS+H2组上清液 LDH活性、TNF?α、IL?1β、IL?6和HMGB1的浓度升高,细胞增殖水平降低,HO?1表达上调, LPS组和LPS+H2组细胞Nrf2表达上调(P<0.05);与LPS组比较,LPS+H2组上清液LDH活性、TNF?α、IL?1β、IL?6和HMGB1的浓度降低,细胞增殖水平升高,Nrf2
作者:王志勇;陈红光;王露;于泳浩;谢克亮
来源:中华麻醉学杂志 2016 年 36卷 11期