目的 评价自噬在氢减轻脓毒症小鼠肺损伤中的作用.方法 清洁级健康雄性ICR小鼠60只,6周龄,体重20 ~ 25 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sh组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+氢气组(Sep+H2组)、脓毒症+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(Sep+ 3-MA组)和脓毒症+3-甲基腺嘌呤组+氢气组(Sep+3-MA+H2组).采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症模型,于术前1h时腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg,吸入氢气给药方案:术后1和6h时分别吸入2%氢气1h.术后24 h时采集动脉血样,测定PaO2,计算氧合指数,取肺组织,进行病理学评分;分离线粒体,采用Clark氧电极法测呼吸控制率(RCR),采用荧光分光光度法检测线粒体膜电位(MMP),采用萤光素-萤光酶发光法检测线粒体ATP含量;采用Western blot法测定自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,计算LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ表达的比值(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ).结果 与Sh组比较,Sep组和Sep+H2组肺组织病理学评分升高,氧合指数、肺组织线粒体RCR、MMP和ATP含量降低,肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高(P<0.05);与Sep组比较,Sep+H2组肺组织病理学评分降低,氧合指数、肺组织线粒体RCR、MMP和ATP含量升高,肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高,SEP+3-MA组肺组织病理学评分升高,氧合指数、肺组织线粒体RCR、MMP和ATP含量降低,肺组织LC3-Ⅱ/LC
作者:董艾莉;王露;王妍妍;边映雪;于泳浩;谢克亮
来源:中华麻醉学杂志 2017 年 37卷 5期