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目的 评价激活大麻素2型受体(CB2R)对脓毒症小鼠急性肺损的影响及自噬在其中的作用.方法 SPF级雄性C57BL/6小鼠24只,8~10周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+CB2R激动剂HU308组(Sep+ HU308组)、脓毒症+HU308+自噬抑制剂3-甲基腺苷组(Sep+HU308+3-MA组).采用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症模型.Sep+HU308组和Sep+HU308+3-MA组于术后15 min时腹腔注射HU308 2.5 mg/kg,15min后Sep+HU308+3-MA组腹腔注射3-甲基腺苷10 mg/kg.术后12h时取肺组织,HE染色观察病理学结果,并进行肺损伤评分;采用RT-PCR法检测TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA表达水平;采用免疫组织化学法测定自噬相关蛋白Atg5的表达;采用Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62的表达水平,计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值.结果 与Sham组比较,其余3组肺组织TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA、Atg5表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,肺损伤评分升高,Sep组和Sep+HU308组Beclin-1表达上调,p62表达下调,Sep+HU308+3-MA组p62表达上调(P<0.05);与Sep组比较,Sep+HU308组和Sep+HU308+3-MA组肺组织TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA表达下调,Atg5表达上调,肺损伤评分降低,Sep+HU308组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,Beclin-1

作者:袁清红;刘强胜;刘安鹏;郑菲;王焱林;张宗泽;詹佳

来源:中华麻醉学杂志 2018 年 38卷 12期

知识库介绍

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作者:
袁清红;刘强胜;刘安鹏;郑菲;王焱林;张宗泽;詹佳
来源:
中华麻醉学杂志 2018 年 38卷 12期
标签:
受体,大麻酚,CB2 自噬 脓毒症 呼吸窘迫综合征,成人 Receptor,cannabinoid,CB2 Autophagy Sepsis Respiratory distress syndrome,adult
目的 评价激活大麻素2型受体(CB2R)对脓毒症小鼠急性肺损的影响及自噬在其中的作用.方法 SPF级雄性C57BL/6小鼠24只,8~10周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+CB2R激动剂HU308组(Sep+ HU308组)、脓毒症+HU308+自噬抑制剂3-甲基腺苷组(Sep+HU308+3-MA组).采用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症模型.Sep+HU308组和Sep+HU308+3-MA组于术后15 min时腹腔注射HU308 2.5 mg/kg,15min后Sep+HU308+3-MA组腹腔注射3-甲基腺苷10 mg/kg.术后12h时取肺组织,HE染色观察病理学结果,并进行肺损伤评分;采用RT-PCR法检测TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA表达水平;采用免疫组织化学法测定自噬相关蛋白Atg5的表达;采用Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62的表达水平,计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值.结果 与Sham组比较,其余3组肺组织TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA、Atg5表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,肺损伤评分升高,Sep组和Sep+HU308组Beclin-1表达上调,p62表达下调,Sep+HU308+3-MA组p62表达上调(P<0.05);与Sep组比较,Sep+HU308组和Sep+HU308+3-MA组肺组织TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA表达下调,Atg5表达上调,肺损伤评分降低,Sep+HU308组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,Beclin-1