目的 评价机械牵张诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)黏附能力增强时内皮素-1(ET-1)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的关系.方法 将PMVECs以0.5×105个/ml的密度接种于培养板(2 ml/孔),采用随机数字表法分为5组(n=24):正常对照组(C组)、机械牵张组(MS组)、机械牵张+PI3K特异性抑制剂LY294002组(LY组)、机械牵张+p38 MAPK特异性抑制剂SB203580组(SB组)、机械牵张+ET受体A阻断剂BQ123组(BQ组).机械牵张:拉伸幅度20％,频率0.3 Hz,波形为正弦波,时间4h.LY组、SB组和BQ组在机械牵张后分别加入终浓度均为10 μmol/L的LY294002、SB203580和BQ123,孵育10 min;随后加入提取的PMNs(5×105/孔)作用30 min.采用ELISA法检测培养液ET-1和IL-6浓度.采用Western blot法测定磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和磷酸化Akt(p-Akt)表达水平.采用免疫组化法确定PMNs黏附率.采用real-time PCR法测定P-选择素mRNA的表达水平.结果 与C组比较,其余4组培养液IL-6和ET-1浓度升高,p-p38 MAPK、p-Akt和P-选择素mRNA表达上调,PMNs黏附率升高(P＜0.05).与MS组比较,LY组、SB组和BQ组培养液IL-6浓度降低,p-Akt和P-选择素mRNA表达下调,PMNs黏附率降低,BQ组培养液ET-1浓度降低,SB组和BQ组p-p38

作者：忽新刚；刘豹；马利军；张晓菊；王凯；刘智达；黄泰博；尚俊依；王学林

来源：中华麻醉学杂志 2017 年 37卷 8期