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目的 评价Toll样受体4(TLR4)在新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡中的作用.方法 取出生1~3d的SD新生大鼠心肌细胞,在含20%胎牛血清的DMEM培养液中原代培养,将细胞接种于6孔细胞培养板,采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)正常培养24h;缺氧复氧组(H/R组)行缺氧2h后复氧4h;阴性对照转染组(con-siRNA组)和TLR4-siRNA组用siRNA、TLR4-siRNA转染,终浓度为80 nmol/L.于缺氧复氧损伤模型制备成功后,采用MTT法观察心肌细胞存活情况,采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测TLR4 mRNA的表达,采用Western blot法检测心肌细胞TLR4、Bcl-2、Bax及caspase-3的表达.结果 与C组比较,其余3组心肌细胞存活率降低,TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达上调,心肌细胞凋亡率升高,Bcl-2表达下调(P<0.01);与H/R组和con-siRNA组比较,TLR4-siRNA组心肌细胞存活率升高,TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达下调,心肌细胞凋亡率降低,Bcl-2表达上调(P<0.01).结论 Toll样受体4可通过下调Bcl-2表达,上调caspase-3及Bax表达,参与新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡的过程.

作者:郑勇萍;王赟;王成夭;张宗泽;王焱林

来源:中华麻醉学杂志 2018 年 38卷 4期

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作者:
郑勇萍;王赟;王成夭;张宗泽;王焱林
来源:
中华麻醉学杂志 2018 年 38卷 4期
标签:
Toll样受体4 RNA,小分子干扰 肌细胞,心脏 缺氧 细胞凋亡 Toll-like receptor 4 RNA,small interfering Myocytes,cardiac Anoxia Apoptosis
目的 评价Toll样受体4(TLR4)在新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡中的作用.方法 取出生1~3d的SD新生大鼠心肌细胞,在含20%胎牛血清的DMEM培养液中原代培养,将细胞接种于6孔细胞培养板,采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)正常培养24h;缺氧复氧组(H/R组)行缺氧2h后复氧4h;阴性对照转染组(con-siRNA组)和TLR4-siRNA组用siRNA、TLR4-siRNA转染,终浓度为80 nmol/L.于缺氧复氧损伤模型制备成功后,采用MTT法观察心肌细胞存活情况,采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测TLR4 mRNA的表达,采用Western blot法检测心肌细胞TLR4、Bcl-2、Bax及caspase-3的表达.结果 与C组比较,其余3组心肌细胞存活率降低,TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达上调,心肌细胞凋亡率升高,Bcl-2表达下调(P<0.01);与H/R组和con-siRNA组比较,TLR4-siRNA组心肌细胞存活率升高,TLR4及其mRNA、caspase-3及Bax的表达下调,心肌细胞凋亡率降低,Bcl-2表达上调(P<0.01).结论 Toll样受体4可通过下调Bcl-2表达,上调caspase-3及Bax表达,参与新生大鼠缺氧复氧心肌细胞凋亡的过程.