目的:评价肝缺血再灌注大鼠外泌体对小胶质细胞焦亡的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠20只，2~3周龄，体重20~50 g，采用随机数字表法分为2组( n＝10)：假手术组(S组)和肝缺血再灌注组(I/R组)。取S组及I/R组大鼠血清，使用超速离心法提取外泌体。将PKH26标记的外泌体与小胶质细胞共孵育6 h，采用免疫荧光法检测外泌体的摄取。将原代小胶质细胞以5×10 5个/ml的密度接种于6孔板，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：对照组(C组)、10 7个/ml肝缺血再灌注外泌体组(10 7组)、10 8个/ml肝缺血再灌注外泌体组(10 8组)和10 9个/ml肝缺血再灌注外泌体组(10 9组)。依次给予相应浓度肝缺血再灌注外泌体共孵育6 h。采用Western blot法检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved-caspase-1)和消皮素D(GSDMD)的表达。采用随机数字表法将原代小胶质细胞分为3组( n＝24)：对照组(C组)、假手术外泌体组(S-exosome组)和肝缺血再灌注外泌体组(I/R-exosome组)。S-exosome组和I/R-exosome组分别给予10 8个/ml的S组、I/R组外泌体孵育6 h。采用RT-PCR法检测NLRP3、ASC和GSDMD mRNA的表达，采用ELISA法

作者：王一丹；贾莉莉；魏敏；吕景淑；孙英；翁亦齐；喻文立

来源：中华麻醉学杂志 2022 年 42卷 1期