目的:评价核受体辅激活因子4 (NCOA4)介导的铁自噬在小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用及其与铁死亡的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠30只，8~10周龄，体重21~25 g，采用随机数字表法分为5组( n＝6)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、肠缺血再灌注＋NCOA4沉默组(I/R＋NCOA4 shRNA组)、肠缺血再灌注＋自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(I/R＋3-MA)和肠缺血再灌注＋NCOA4沉默＋自噬激活剂雷帕霉素组(I/R＋NCOA4 shRNA＋RAPA组)。采用夹闭肠系膜上动脉45 min再灌注的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。于造模前2周，I/R＋NCOA4 shRNA组和I/R＋NCOA4 shRNA＋RAPA组尾静脉注射AAV-NCOA4-shRNA 1×10 11 vp，Sham组、I/R组和I/R＋3-MA组注射AAV shCtrl(腺病毒对照) 1×10 11 vp。于造模前7 d I/R＋NCOA4 sh-RNA＋RAPA组腹腔注射雷帕霉素4 mg/kg，1次/d；于造模前1 h I/R＋3-MA组腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg。于再灌注2 h时，处死取肠组织，行Chiu评分，采用比色法检测MDA、谷胱甘肽(GSH)和Fe 2＋含量，ELISA法检测TNF-α和IL-1β含量，Western blot法检测NCOA4、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达水平

作者：马晓燕；王国平；喻文立

来源：中华麻醉学杂志 2022 年 42卷 8期