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目的探讨雌激素对人乳腺癌MCF-7细胞LRP16 mRNA表达的调控作用以及过表达LRP16对MCF-7细胞生长特性的影响.方法 (1)用Northern印迹方法检测17β-雌二醇(17β-E2)对LRP16 mRNA表达水平的作用;(2)构建LRP16启动子(-2.6 kb)调控的荧光素酶报告子(pGL3-S0),并与各种核受体包括雌激素受体α和β(ERα和ERβ)、糖皮质激素受体α(GRα)、雄激素受体(AR)和过氧化物酶体增殖物激活的受体γ和α(PPARγ和PPARα)表达载体共转染COS-7细胞,测定荧光素酶活性;(3)将LRP16表达载体转染MCF-7细胞,测定过表达LRP16对细胞的生长特性和细胞周期的影响,并用Western印迹方法测定周期素E、p53和p21WAF1/CIP1蛋白的变化.结果 (1)17β-E2使MCF-7细胞的LRP16 mRNA表达水平增加5~8倍,增加幅度未显示出β-E2培养时间和剂量的依赖性;(2)pGL3-S0与ERα或AR共转染细胞的相对荧光素酶活性较单独转染pGL3-S0细胞(对照组)分别升高11和7.8倍;(3)LRP16过表达促进MCF-7细胞的生长且伴有周期素E显著升高,S期细胞的数量较对照组增加约10

作者:韩为东;母义明;卢学春;徐周敏;李续建;于力;宋海静;李明;陆菊明;潘长玉

来源:中华内分泌代谢杂志 2004 年 20卷 2期

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作者:
韩为东;母义明;卢学春;徐周敏;李续建;于力;宋海静;李明;陆菊明;潘长玉
来源:
中华内分泌代谢杂志 2004 年 20卷 2期
标签:
雌激素类 受体,雌激素 细胞周期蛋白E 基因,LRP16 MCF-7细胞
目的探讨雌激素对人乳腺癌MCF-7细胞LRP16 mRNA表达的调控作用以及过表达LRP16对MCF-7细胞生长特性的影响.方法 (1)用Northern印迹方法检测17β-雌二醇(17β-E2)对LRP16 mRNA表达水平的作用;(2)构建LRP16启动子(-2.6 kb)调控的荧光素酶报告子(pGL3-S0),并与各种核受体包括雌激素受体α和β(ERα和ERβ)、糖皮质激素受体α(GRα)、雄激素受体(AR)和过氧化物酶体增殖物激活的受体γ和α(PPARγ和PPARα)表达载体共转染COS-7细胞,测定荧光素酶活性;(3)将LRP16表达载体转染MCF-7细胞,测定过表达LRP16对细胞的生长特性和细胞周期的影响,并用Western印迹方法测定周期素E、p53和p21WAF1/CIP1蛋白的变化.结果 (1)17β-E2使MCF-7细胞的LRP16 mRNA表达水平增加5~8倍,增加幅度未显示出β-E2培养时间和剂量的依赖性;(2)pGL3-S0与ERα或AR共转染细胞的相对荧光素酶活性较单独转染pGL3-S0细胞(对照组)分别升高11和7.8倍;(3)LRP16过表达促进MCF-7细胞的生长且伴有周期素E显著升高,S期细胞的数量较对照组增加约10