目的 研究下调激活转录因子3(ATF3)的表达对肾上腺皮质腺癌细胞增殖的影响及其作用机制.方法 利用免疫组化和Western印迹分别检测ATF3在人肾上腺皮质肿瘤组织和细胞中的表达;运用脂质体2000转染法将siATF3转染肾上腺皮质腺癌细胞Sw-13和NCI-H259R细胞,运用逆转录PCR检测ATF3 mRNA表达;Western印迹法检测ATF3、cleaved caspase 3、caspase 3、cleaved PARP、PARP蛋白表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)和异硫氰酸胍标记磷脂结蛋白(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶( PI)分别测定细胞增殖率和细胞凋亡率;NCI-H259R细胞分别经 NVP-BEZ235、Perifosine、BKM120、IWP-2、PP2、KN93、Everolimus作用后,运用实时荧光定量PCR( realtime PCR)测定ATF3 mRNA的表达;MTT比色法检测ATF3对抑制相关信号通路后细胞增殖的影响.结果 ATF3 在人肾上腺皮质腺肿瘤组织和细胞中呈高表达;而转染siATF3的Sw-13和NCI-F259R细胞ATF3 mRNA和蛋白表达显著降低;与阴性对照组( NC siRNA)比较, siATF3转染显著抑制Sw-13和NCI-F259R细胞增殖(P＜0.05),细胞凋亡率显著增加(P＜0.05);Western印迹结果显示siATF3转染的细胞cleaved caspase 3和cleaved PARP蛋白水平显著增加;realtime PCR结果显示,与二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组相比,PP2、KN93、IWP-2信号通路

作者：魏光敏；陶海云；屈中玉；万里新；刘越

来源：中华内分泌代谢杂志 2018 年 34卷 9期