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目的 探讨β微管蛋白(IUBB)基因在骨髓增生异常综合征(MDS)向白血病转化(简称转白)中的作用.方法 基于复旦大学附属华山医院已建立的MDS患者巢式病例对照研究队列,从中选取符合转白危险因素配对条件的各11例患者建立病例组(发生转白的MDS)和对照组(未发生转白的MDS).采用实时定量PCR检测两组患者骨髓单个核细胞中TUBB mRNA表达水平,并采用生长曲线测定(CCK-8法)、软琼脂克隆形成实验和透射电镜,在MDS转白细胞株(SKM-1细胞株)中观察TUBB基因沉默前后SKM-1细胞株的生物学特性的变化.结果 (1)实时定量PCR结果显示,病例组的TUBB mRNA相对表达水平显著高于对照组(2.91±0.41比0.90±0.23,P<0.01).(2)TUBB基因特异性小干扰RNA(TUBB-siRNA)转染组的SKM-1细胞在转染后24、48和72 h的吸光度值(A450/630nm)分别为0.299±0.045、0.526±0.034和0.652±0.035,均低于相同时点的阴性siRNA转染组(0.438±0.074、0.858±0.064和0.974±0.044,P值均<0.05),TUBB-siRNA转染组SKM-1细胞的增殖活性受到明显抑制作用.(3)软琼脂克隆形成实验显示,TUBB-siRNA转染组的细胞克隆形成率为(7.0±0.2)%,显著小于阴性siRNA转染组的(25.0±0.2)%(P<0.01).(4)透射电镜显示,转染TUBB-siRNA后,SKM-1细胞出现细胞质空泡、核碎裂等细胞凋

作者:马燕;陈波斌;许小平;林果为

来源:中华内科杂志 2016 年 55卷 5期

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作者:
马燕;陈波斌;许小平;林果为
来源:
中华内科杂志 2016 年 55卷 5期
标签:
骨髓增生异常综合征 白血病 巢式病例对照研究 TUBB基因 RNA,小分子干扰 Myelodysplastic syndromes Leukemia Nested case-control study Beta-tubulin gene RNA,small interfering
目的 探讨β微管蛋白(IUBB)基因在骨髓增生异常综合征(MDS)向白血病转化(简称转白)中的作用.方法 基于复旦大学附属华山医院已建立的MDS患者巢式病例对照研究队列,从中选取符合转白危险因素配对条件的各11例患者建立病例组(发生转白的MDS)和对照组(未发生转白的MDS).采用实时定量PCR检测两组患者骨髓单个核细胞中TUBB mRNA表达水平,并采用生长曲线测定(CCK-8法)、软琼脂克隆形成实验和透射电镜,在MDS转白细胞株(SKM-1细胞株)中观察TUBB基因沉默前后SKM-1细胞株的生物学特性的变化.结果 (1)实时定量PCR结果显示,病例组的TUBB mRNA相对表达水平显著高于对照组(2.91±0.41比0.90±0.23,P<0.01).(2)TUBB基因特异性小干扰RNA(TUBB-siRNA)转染组的SKM-1细胞在转染后24、48和72 h的吸光度值(A450/630nm)分别为0.299±0.045、0.526±0.034和0.652±0.035,均低于相同时点的阴性siRNA转染组(0.438±0.074、0.858±0.064和0.974±0.044,P值均<0.05),TUBB-siRNA转染组SKM-1细胞的增殖活性受到明显抑制作用.(3)软琼脂克隆形成实验显示,TUBB-siRNA转染组的细胞克隆形成率为(7.0±0.2)%,显著小于阴性siRNA转染组的(25.0±0.2)%(P<0.01).(4)透射电镜显示,转染TUBB-siRNA后,SKM-1细胞出现细胞质空泡、核碎裂等细胞凋