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目的 构建shRNA-Survivin慢病毒载体,对肺腺癌A549细胞中Survivin基因表达进行干扰,探讨其对肿瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 将A549细胞分成3组,即空白对照组,空白病毒载体对照组和shRNA干扰Survivin慢病毒载体组.采用慢病毒载体构建的方法,采用RT-qPCR和Western-Blot检测凋亡因子Caspase-3和Caspase-9的表达量,采用CCK-8试剂盒检测肺癌细胞的增殖,Transwell小室检测肺癌细胞的迁移,AV-PI凋亡试剂盒检测肺癌细胞的凋亡.结果 ①慢病毒转染效率较高,以肺癌细胞A549为靶点种子细胞,慢病毒转染率为90%;②空白载体病毒组的Caspase-3的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.231±0.112,n=3),shRNA-Survivin组的Caspase-3的mRNA的相对表达量为(0.121±0.009,n=3);两组比较具有统计学差异(t=2.097,P=0.0219<0.05),Caspase-9的mRNA表达具有相同的趋势;③Caspase-3的蛋白相对表达量为(0.173±0.231,n=3),shRNA-Survivin组与空白载体病毒组相比,具有统计学差异(t=3.221,P=0.0241 <0.05);④Transwell实验结果,CCK-8检测结果和AV-PI检测结果显示,空白对照组、空白载体病毒组、shRNA-Survivin组三组之间比较具有明显的统计学差异(P<0.05).结论 shRNA干扰Survivin可以有效的抑制肺癌细胞的迁移和增殖,并且

作者:吴呈霖;王梅芳;雷怀定

来源:中华肺部疾病杂志(电子版) 2018 年 11卷 6期

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作者:
吴呈霖;王梅芳;雷怀定
来源:
中华肺部疾病杂志(电子版) 2018 年 11卷 6期
标签:
Survivin 肺癌细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 Survivin Lung cancer cells Cell proliferation Cell migration Cell apoptosis
目的 构建shRNA-Survivin慢病毒载体,对肺腺癌A549细胞中Survivin基因表达进行干扰,探讨其对肿瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 将A549细胞分成3组,即空白对照组,空白病毒载体对照组和shRNA干扰Survivin慢病毒载体组.采用慢病毒载体构建的方法,采用RT-qPCR和Western-Blot检测凋亡因子Caspase-3和Caspase-9的表达量,采用CCK-8试剂盒检测肺癌细胞的增殖,Transwell小室检测肺癌细胞的迁移,AV-PI凋亡试剂盒检测肺癌细胞的凋亡.结果 ①慢病毒转染效率较高,以肺癌细胞A549为靶点种子细胞,慢病毒转染率为90%;②空白载体病毒组的Caspase-3的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.231±0.112,n=3),shRNA-Survivin组的Caspase-3的mRNA的相对表达量为(0.121±0.009,n=3);两组比较具有统计学差异(t=2.097,P=0.0219<0.05),Caspase-9的mRNA表达具有相同的趋势;③Caspase-3的蛋白相对表达量为(0.173±0.231,n=3),shRNA-Survivin组与空白载体病毒组相比,具有统计学差异(t=3.221,P=0.0241 <0.05);④Transwell实验结果,CCK-8检测结果和AV-PI检测结果显示,空白对照组、空白载体病毒组、shRNA-Survivin组三组之间比较具有明显的统计学差异(P<0.05).结论 shRNA干扰Survivin可以有效的抑制肺癌细胞的迁移和增殖,并且