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目的 探讨核因子E2p45相关因子2(Nrf2)核转位对永生化黑素细胞株B10BR细胞生物学活性的影响.方法 构建电转染野生型和nls缺失型nrf2质粒载体至B10BR细胞,结合叔丁基氢醌(TBHQ)和(或)H2O2处理,Western印迹检测Nrf2,his标签蛋白表达,MTr法测定细胞活性,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性,Transwell法测定转染细胞的迁移.结果 TBHQ处理的转染组细胞核中Nrf2表达均显著高于TBHQ未处理组(P<0.01).转染质粒组间及其与未处理组间细胞酪氨酸酶活性差异均无统计学意义(P>0.05),H2O2处理使2个质粒转染组酪氨酸酶活性较单独质粒转染组显著下降(pcDNA-nrf2,P<0.05; pcDNA-nrf2△nls,P< 0.05).相对于TBHQ未添加H2O2处理的nrf2组,TBHQ显著增强H2O2处理的野生型nrf2质粒转染细胞酪氨酸酶活性(P<0.05);相对于TBHQ未添加H2O2处理的nls组,nls缺失型nrf2质粒转染组细胞酪氨酸酶活性差异无统计学意义(P>0.05).相对于nrf2未转染组,H2O2对野生型nrf2质粒转染组细胞活性的影响无统计学意义(P>0.05);相对于两组的未处理组,H2O2引起未转染组及nls缺失型质粒转染组细胞活性显著下降(未处理组,P< 0.05;pcDNA-nrf2△nls,P<0.01).TBHQ可以保护野生型nf2质粒转染细胞免受H2O2引起的氧化损伤,对nls缺失型质粒转染组细胞无明显保护

作者:林福全;许文;周妙妮;洪为松;傅丽芳;许爱娥;关翠萍

来源:中华皮肤科杂志 2013 年 46卷 8期

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林福全;许文;周妙妮;洪为松;傅丽芳;许爱娥;关翠萍
来源:
中华皮肤科杂志 2013 年 46卷 8期
标签:
黑素细胞 核因子E2p45相关因子2 核转位 一元酚单氧酶 Melanocytes E2p45 related factor 2 Nuclear translocation Monophenol monooxygenase
目的 探讨核因子E2p45相关因子2(Nrf2)核转位对永生化黑素细胞株B10BR细胞生物学活性的影响.方法 构建电转染野生型和nls缺失型nrf2质粒载体至B10BR细胞,结合叔丁基氢醌(TBHQ)和(或)H2O2处理,Western印迹检测Nrf2,his标签蛋白表达,MTr法测定细胞活性,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性,Transwell法测定转染细胞的迁移.结果 TBHQ处理的转染组细胞核中Nrf2表达均显著高于TBHQ未处理组(P<0.01).转染质粒组间及其与未处理组间细胞酪氨酸酶活性差异均无统计学意义(P>0.05),H2O2处理使2个质粒转染组酪氨酸酶活性较单独质粒转染组显著下降(pcDNA-nrf2,P<0.05; pcDNA-nrf2△nls,P< 0.05).相对于TBHQ未添加H2O2处理的nrf2组,TBHQ显著增强H2O2处理的野生型nrf2质粒转染细胞酪氨酸酶活性(P<0.05);相对于TBHQ未添加H2O2处理的nls组,nls缺失型nrf2质粒转染组细胞酪氨酸酶活性差异无统计学意义(P>0.05).相对于nrf2未转染组,H2O2对野生型nrf2质粒转染组细胞活性的影响无统计学意义(P>0.05);相对于两组的未处理组,H2O2引起未转染组及nls缺失型质粒转染组细胞活性显著下降(未处理组,P< 0.05;pcDNA-nrf2△nls,P<0.01).TBHQ可以保护野生型nf2质粒转染细胞免受H2O2引起的氧化损伤,对nls缺失型质粒转染组细胞无明显保护