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目的 探讨烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞内信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活的影响.方法 106、107 CFU/ml烟曲霉悬液(106和107 CFU/ml烟曲霉组)、100 mg/L阳性刺激物β-葡聚糖(β-葡聚糖组)及培养基(空白对照组)分别与2×105/ml THP-1细胞共孵育1、3、6h,实时荧光定量PCR分析各组THP-1细胞TNF-αmRNA表达水平.107 CFU/ml烟曲霉悬液(烟曲霉组)、β-葡聚糖(β-葡聚糖组)及培养基分别作用THP-1细胞24 h,酶联免疫吸附法检测各组培养上清液中TNF-α含量.Western印迹法检测107 CFU/ml烟曲霉体外作用THP-1细胞后15、30、60 min p38MAPK和磷酸化p38MAPK水平.采用20 μmol/LSB203580预先与THP-1细胞共培养2h后,再用107 CFU/ml烟曲霉、β-葡聚糖或培养基作用6h,检测各组THP-1细胞TNF-α mRNA表达水平变化.结果 106、107 CFU/ml烟曲霉组、100 mg/L β-葡聚糖组及空白对照组TNF-α mRNA表达水平差异有统计学意义(F=110.983,P<0.001),且随培养时间延长,THP-1细胞TNF-α mRNA水平增高(F=701.680,P<0.001).107 CFU/ml烟曲霉刺激THP-1细胞24 h后,TNF-α蛋白水平(6 236.30±437.12 ng/L)较空白对照组(132.10±0.61 ng/L)明显升高(P<0.01).107 CFU/ml烟曲霉作用

作者:童建波;杜蕾蕾;曾荣;王丽玮;刘宇甄;段志敏;陈青;李岷

来源:中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 9期

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作者:
童建波;杜蕾蕾;曾荣;王丽玮;刘宇甄;段志敏;陈青;李岷
来源:
中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 9期
标签:
烟曲霉菌 肿瘤坏死因子α p38丝裂原活化蛋白激酶类 THP-1细胞 Aspergillus fumigatus Tumor necrosis factor-alpha p38 Mitogen-activated protein kinases THP-1 cells
目的 探讨烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞内信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活的影响.方法 106、107 CFU/ml烟曲霉悬液(106和107 CFU/ml烟曲霉组)、100 mg/L阳性刺激物β-葡聚糖(β-葡聚糖组)及培养基(空白对照组)分别与2×105/ml THP-1细胞共孵育1、3、6h,实时荧光定量PCR分析各组THP-1细胞TNF-αmRNA表达水平.107 CFU/ml烟曲霉悬液(烟曲霉组)、β-葡聚糖(β-葡聚糖组)及培养基分别作用THP-1细胞24 h,酶联免疫吸附法检测各组培养上清液中TNF-α含量.Western印迹法检测107 CFU/ml烟曲霉体外作用THP-1细胞后15、30、60 min p38MAPK和磷酸化p38MAPK水平.采用20 μmol/LSB203580预先与THP-1细胞共培养2h后,再用107 CFU/ml烟曲霉、β-葡聚糖或培养基作用6h,检测各组THP-1细胞TNF-α mRNA表达水平变化.结果 106、107 CFU/ml烟曲霉组、100 mg/L β-葡聚糖组及空白对照组TNF-α mRNA表达水平差异有统计学意义(F=110.983,P<0.001),且随培养时间延长,THP-1细胞TNF-α mRNA水平增高(F=701.680,P<0.001).107 CFU/ml烟曲霉刺激THP-1细胞24 h后,TNF-α蛋白水平(6 236.30±437.12 ng/L)较空白对照组(132.10±0.61 ng/L)明显升高(P<0.01).107 CFU/ml烟曲霉作用