目的 研究腺病毒介导的血管内皮生长因子(VEGF)启动子驱动胞嘧啶脱氨酶(CD)/胸苷激酶(TK)融合基因系统(Ad-VEGFP-CDTK)对胰腺癌细胞SW1990增殖的影响.方法 重组腺病毒体外感染表达VEGF的SW1990细胞株,用空腺病毒做对照,观察其感染效率并以RT-PCR、Western blot方法检测转基因细胞CDTK的表达,MTF法观察该体系对SW1990细胞生长增殖的影响及其旁观者效应;电镜观察细胞的病变;流式细胞仪检测细胞周期的变化和DNA含量的变化;分光光度法检测细胞内caspase-3活性. 结果两种腺病毒对细胞株的感染率相似.RT-PCR和Western blot检测发现转染Ad-VEGFP-CDTK的细胞有目的基因和蛋白的表达.MTT法检测显示前药呈剂量依赖性抑制SW1990生长,且观察到该体系明显的旁观者效应.电镜下可见SW1990有凋亡改变.用流式细胞仪测定用药组出现典型的凋亡峰;细胞周期分析显示治疗后细胞G0-G1期比率增多,G2-M及S期细胞减少.随着前药浓度的升高转基因细胞内caspase-3活性逐渐升高.结论 VEGF启动子可调控双自杀基因体系抑制胰腺癌细胞SW1990增殖,并且诱导胰腺癌细胞凋亡.
作者：黄宗海；孔恒；闫振宇；陈旭
来源：中华普通外科杂志 2008 年 23卷 3期
