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目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 0f p53,ASPP2)对饥饿诱导的大肠癌HCT116 p53-/-(p53缺失)细胞自噬和凋亡的影响.方法 实验分3组:(1)绿色荧光蛋白腺病毒(green fluorescent protein adenovirus,rAd-GFP)感染组(对照组);(2)自噬抑制剂LY294002处理组;(3) ASPP 2腺病毒(ASPP2 adenovirus,rAd-ASPP2)感染组.无血清培养基分别培养0、24、48 h诱导细胞自噬和凋亡.利用calcein/PI吸收试验观察各组细胞凋亡水平.细胞转染红色荧光蛋白自噬质粒Lc3(cerise fluorescent protein autophagy plasmid Lc3,CFP-Lc3),在荧光显微镜下观察各组细胞自噬水平.结果 rAd-GFP感染组饥饿24h细胞的自噬水平升高显著(0 h:1.04±0.24;24 h:12.17 ±0.86,P<0.05),而凋亡水平改变差异无统计学意义(0 h:2.01%±0.06%;24 h:3.23%±0.34%,P>0.05);饥饿时间延长至48 h,自噬水平(0 h:1.04±0.24;48 h:21.09±3.32)和凋亡水平(0h:2.01%±0.06%;48 h:30.20%±3.18%)升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05).使用LY294002抑制细胞自噬,饥饿24 h细胞凋亡显著增多(rAd-GFP组:3.23%±0.34%;LY294002组:15.68%±1.24%,P<0.01),而饥饿48 h凋亡显著减少(rAd-GFP组:30.20%±3.18%;LY294002组:25

作者:侯庆生;丁谓;陈德喜;张玉林;郭洪亮

来源:中华普通外科杂志 2013 年 28卷 2期

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作者:
侯庆生;丁谓;陈德喜;张玉林;郭洪亮
来源:
中华普通外科杂志 2013 年 28卷 2期
标签:
结直肠肿瘤 肿瘤抑制蛋白质,p53 自噬 细胞凋亡 Colorectal neoplasms Tumor suppressor protein,p53 Autophagy Apoptosis
目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 0f p53,ASPP2)对饥饿诱导的大肠癌HCT116 p53-/-(p53缺失)细胞自噬和凋亡的影响.方法 实验分3组:(1)绿色荧光蛋白腺病毒(green fluorescent protein adenovirus,rAd-GFP)感染组(对照组);(2)自噬抑制剂LY294002处理组;(3) ASPP 2腺病毒(ASPP2 adenovirus,rAd-ASPP2)感染组.无血清培养基分别培养0、24、48 h诱导细胞自噬和凋亡.利用calcein/PI吸收试验观察各组细胞凋亡水平.细胞转染红色荧光蛋白自噬质粒Lc3(cerise fluorescent protein autophagy plasmid Lc3,CFP-Lc3),在荧光显微镜下观察各组细胞自噬水平.结果 rAd-GFP感染组饥饿24h细胞的自噬水平升高显著(0 h:1.04±0.24;24 h:12.17 ±0.86,P<0.05),而凋亡水平改变差异无统计学意义(0 h:2.01%±0.06%;24 h:3.23%±0.34%,P>0.05);饥饿时间延长至48 h,自噬水平(0 h:1.04±0.24;48 h:21.09±3.32)和凋亡水平(0h:2.01%±0.06%;48 h:30.20%±3.18%)升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05).使用LY294002抑制细胞自噬,饥饿24 h细胞凋亡显著增多(rAd-GFP组:3.23%±0.34%;LY294002组:15.68%±1.24%,P<0.01),而饥饿48 h凋亡显著减少(rAd-GFP组:30.20%±3.18%;LY294002组:25