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目的 检测乙酰肝素酶(HPSE)基因与血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因在胰腺导管细胞癌组织中的表达,构建含HPSE基因的质粒及针对HPSE基因的小干扰RNA(siRNA),体外观察其对胰腺癌BxPC-3细胞系VEGF-C表达水平及恶性生物学行为的影响.方法 RT-qPCR检测34例胰腺癌组织中两种基因的相对表达水平,分析其与临床病理特征的关系.设计并构建重组质粒GV230/HPSE及HPSE-siRNA,脂质体介导法转染BxPC-3细胞,RT-qPCR及Western blot检测HPSE及VEGF-C的表达状况,Transwell侵袭实验及细胞划痕实验观察转染细胞体外侵袭迁移能力的改变.结果 Spearman秩相关分析显示胰腺癌组织HPSE与VEGF-C的mRNA水平呈正相关(r=0.812,P<0.01),HPSE与VEGF-C的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P<0.01).RT-qPCR与Western blot结果显示GV230/HPSE组与空白对照组相比HPSE及VEGF-C的mRNA及蛋白水平均增高(P<0.01),HPSE-siRNA组两种基因的mRNA及蛋白的水平均降低(P<0.01).Transwell侵袭实验及细胞划痕实验中过表达组的侵袭能力增强(P<0.05),干扰组细胞的侵袭能力被抑制(P<0.05). 结论 联合检测HPSE mRNA与VEGF-C mRNA有助于指导胰腺癌临床治疗及判断预后.HPSE可调控胰腺癌细胞VEGF-C的表达,并提高其体外侵袭迁移能力,提示HPSE

作者:张斌;曾庆东;吕斌;王大伟

来源:中华普通外科杂志 2015 年 30卷 5期

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作者:
张斌;曾庆东;吕斌;王大伟
来源:
中华普通外科杂志 2015 年 30卷 5期
标签:
胰腺肿瘤 血管内皮生长因子C 乙酰肝素酶 RNA干扰 肿瘤侵润 Pancreatic neoplasms Vascular endothelial growth factor C Heparanase RNA interference Neoplasm invasiveness
目的 检测乙酰肝素酶(HPSE)基因与血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因在胰腺导管细胞癌组织中的表达,构建含HPSE基因的质粒及针对HPSE基因的小干扰RNA(siRNA),体外观察其对胰腺癌BxPC-3细胞系VEGF-C表达水平及恶性生物学行为的影响.方法 RT-qPCR检测34例胰腺癌组织中两种基因的相对表达水平,分析其与临床病理特征的关系.设计并构建重组质粒GV230/HPSE及HPSE-siRNA,脂质体介导法转染BxPC-3细胞,RT-qPCR及Western blot检测HPSE及VEGF-C的表达状况,Transwell侵袭实验及细胞划痕实验观察转染细胞体外侵袭迁移能力的改变.结果 Spearman秩相关分析显示胰腺癌组织HPSE与VEGF-C的mRNA水平呈正相关(r=0.812,P<0.01),HPSE与VEGF-C的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P<0.01).RT-qPCR与Western blot结果显示GV230/HPSE组与空白对照组相比HPSE及VEGF-C的mRNA及蛋白水平均增高(P<0.01),HPSE-siRNA组两种基因的mRNA及蛋白的水平均降低(P<0.01).Transwell侵袭实验及细胞划痕实验中过表达组的侵袭能力增强(P<0.05),干扰组细胞的侵袭能力被抑制(P<0.05). 结论 联合检测HPSE mRNA与VEGF-C mRNA有助于指导胰腺癌临床治疗及判断预后.HPSE可调控胰腺癌细胞VEGF-C的表达,并提高其体外侵袭迁移能力,提示HPSE