目的 探讨乙肝病毒X蛋白(HBX)和炎症微环境M2巨噬细胞对肝癌细胞侵袭转移的影响.方法 HBX/LV5慢病毒转染Hep3B细胞后与人单核细胞系THP-1来源的M2巨噬细胞共培养,形成肝癌微环境模型.实验分2组:感染组(Hep3B+、Hep3B++M2)、非感染组(Hep3B、Hep3B-+LV5、Hep3B-+ LV5+ M2,、Hep3B-+M2).采用Western blot检测Hep3B细胞转染前后的上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、上皮标志物(E-cadherin)和间叶标志物(N-cadherin),用激光共聚焦显微镜观察E-cadherin和N-cadherin在Hep3B细胞的分子定位,通过transwell实验评价其侵袭转移能力.结果 HBX/LV5成功转染到Hep3B细胞内,并在细胞内稳定表达HBX蛋白(Hep3B+).Hep3B+与M2共培养72 h后,经Western blot检测发现Hep3B+E-cadherin表达(0.42±0.11)较Hep3B-(1.00±0.18)明显下调(t=4.762,P＜0.05),N-cadherin表达(2.85±0.44)较Hep3B (1.00±0.17)明显上调(t=6.793,P＜0.05).Hep3B++M2 E-cadherin(0.1 ±0.13)表达较Hep3B+显著下调(t=3.255,P＜0.05),N-cadherin表达(4.18±0.52)较Hep3B+显著上调(t=10.009,P＜0.05);非感染组EMT标记分子表达水平无明显变化;TransWell实验提示感染组侵袭转移能力显著提高.结论 乙型肝炎病毒HBX蛋白和M2巨噬细胞通过EMT机

作者：杜恒；戴德坚；郭晓雷；程明荣；汪运节；陈益鸣

来源：中华普通外科杂志 2016 年 31卷 6期