您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览234 | 下载177

目的 探讨miRNA-30a-3p通过靶向作用自噬相关蛋白3(Atg3)介导的自噬通路,对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响.方法 利用免疫组化检测人肝癌肝组织中miRNA-30a-3p、Atg3含量及其相关性;体外培养肝癌细胞,模拟饥饿环境诱导自噬,LC3自噬双标腺病毒转染肝癌细胞以检测自噬体形成情况.蛋白印迹实验(Western blot)检测自噬相关蛋白[自噬相关蛋白3(Atg3)、泛素结合蛋白(p62)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)]和上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白[钙黏附分子N(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、snail蛋白、胞质紧密粘连蛋白1(ZO-1)]表达水平.CCK-8试剂盒检测肝癌细胞活性.结果 促进肝癌细胞中miRNA-30a-3p表达,可降低Atg3、LC3表达、增加p62表达,抑制自噬体形成;反之,可增加Atg3、LC3表达、降低p62表达,促进自噬体形成.抑制Atg3表达,可使EMT相关蛋白表达降低.抑制miRNA-30a-3p表达,肝癌活性细胞数量在各个时间点呈升高趋势(F1=10.314,P<0.05);而抑制miRNA-30a-3p表达的同时抑制Atg3表达,肝癌活性细胞数量在各个时间点呈下降趋势(F2=6.599,P<0.05).结论 miRNA-30a-3p能抑制Atg3介导的自噬通路,降低细胞自噬活性,从而抑制肝癌细胞增殖、侵袭和转移.

作者:杜晨阳;张建军;王振;宋虎;李世朋;张海明;郑虹;沈中阳

来源:中华普通外科杂志 2018 年 33卷 4期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:234 | 下载:177
作者:
杜晨阳;张建军;王振;宋虎;李世朋;张海明;郑虹;沈中阳
来源:
中华普通外科杂志 2018 年 33卷 4期
标签:
癌,肝细胞 微RNAs 自噬 肿瘤转移 Carcinoma,hepatocellular MicoRNAs Autophagy Neoplasm metastasis
目的 探讨miRNA-30a-3p通过靶向作用自噬相关蛋白3(Atg3)介导的自噬通路,对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响.方法 利用免疫组化检测人肝癌肝组织中miRNA-30a-3p、Atg3含量及其相关性;体外培养肝癌细胞,模拟饥饿环境诱导自噬,LC3自噬双标腺病毒转染肝癌细胞以检测自噬体形成情况.蛋白印迹实验(Western blot)检测自噬相关蛋白[自噬相关蛋白3(Atg3)、泛素结合蛋白(p62)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)]和上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白[钙黏附分子N(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、snail蛋白、胞质紧密粘连蛋白1(ZO-1)]表达水平.CCK-8试剂盒检测肝癌细胞活性.结果 促进肝癌细胞中miRNA-30a-3p表达,可降低Atg3、LC3表达、增加p62表达,抑制自噬体形成;反之,可增加Atg3、LC3表达、降低p62表达,促进自噬体形成.抑制Atg3表达,可使EMT相关蛋白表达降低.抑制miRNA-30a-3p表达,肝癌活性细胞数量在各个时间点呈升高趋势(F1=10.314,P<0.05);而抑制miRNA-30a-3p表达的同时抑制Atg3表达,肝癌活性细胞数量在各个时间点呈下降趋势(F2=6.599,P<0.05).结论 miRNA-30a-3p能抑制Atg3介导的自噬通路,降低细胞自噬活性,从而抑制肝癌细胞增殖、侵袭和转移.