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目的 研究乙醛脱氢酶2 (ALDH2)介导乙醇预处理减轻小鼠肾小管上皮细胞(TEC)缺血再灌注(IR)损伤的作用.方法 取C57BL/6J小鼠的TEC,进行原代培养.小鼠TEC经乙醇预处理3h后,建立体外模拟IR的模型,检测细胞的乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,观察乙醇预处理减轻TEC的IR损伤的作用.采用已构建的ALDH2的小干扰RNA(ALDH2-siRNA)转染TEC,转染48 h后采用蛋白质印迹法验证ALDH2蛋白的变化情况,检测ALDH酶活性的改变,然后进行乙醇预处理和模拟IR操作,最后检测TEC的LDH漏出率,分析ALDH2在乙醇预处理减轻TEC的IR损伤中的作用.结果 乙醇预处理显著降低了IR后小鼠TEC的LDH漏出率,验证了乙醇预处理减轻小鼠TEC的IR损伤的作用;转染ALDH2-siRNA后,TEC的ALDH2蛋白含量下降82.1%,ALDH酶活性下降了67.3%.在下调ALDH2表达之后,乙醇预处理减轻TEC的IR损伤的作用几乎消失.结论 乙醇预处理可以减轻小鼠TEC的IR损伤,ALDH2酶在此效应中发挥了重要作用.

作者:蔡明;袁清;崔瀚文;洪善娟;曾力;王全兴;朱有华

来源:中华器官移植杂志 2012 年 33卷 8期

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作者:
蔡明;袁清;崔瀚文;洪善娟;曾力;王全兴;朱有华
来源:
中华器官移植杂志 2012 年 33卷 8期
标签:
小鼠 肾小管 上皮细胞 再灌注损伤 乙醛脱氢酶2 乙醇 Mice Kidney tubules Epithelial cells Reperfusion injury Aldehyde dehydrogenase 2 Ethanol
目的 研究乙醛脱氢酶2 (ALDH2)介导乙醇预处理减轻小鼠肾小管上皮细胞(TEC)缺血再灌注(IR)损伤的作用.方法 取C57BL/6J小鼠的TEC,进行原代培养.小鼠TEC经乙醇预处理3h后,建立体外模拟IR的模型,检测细胞的乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,观察乙醇预处理减轻TEC的IR损伤的作用.采用已构建的ALDH2的小干扰RNA(ALDH2-siRNA)转染TEC,转染48 h后采用蛋白质印迹法验证ALDH2蛋白的变化情况,检测ALDH酶活性的改变,然后进行乙醇预处理和模拟IR操作,最后检测TEC的LDH漏出率,分析ALDH2在乙醇预处理减轻TEC的IR损伤中的作用.结果 乙醇预处理显著降低了IR后小鼠TEC的LDH漏出率,验证了乙醇预处理减轻小鼠TEC的IR损伤的作用;转染ALDH2-siRNA后,TEC的ALDH2蛋白含量下降82.1%,ALDH酶活性下降了67.3%.在下调ALDH2表达之后,乙醇预处理减轻TEC的IR损伤的作用几乎消失.结论 乙醇预处理可以减轻小鼠TEC的IR损伤,ALDH2酶在此效应中发挥了重要作用.