目的 探讨α-1抗胰蛋白酶(A1AT)减轻胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及促进胰岛β细胞增殖.方法 (1)体外实验:选10只BALB/c小鼠,挑取所有的胰岛并收集胰腺外分泌细胞.纯化胰岛组(n=6),每孔100个胰岛,常规培养;实验组(n=6),每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养,并加入A1AT(0.5 mg/ml);对照组(n=6),每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养.48 h后,收集各孔上清液,分别检测胰岛素含量及胰蛋白酶浓度;然后分别换低糖、高糖RPMI-1640培养液,行胰岛素释放实验.(2)体内实验:链脲佐菌素腹腔注射诱导BALB/c小鼠成为糖尿病小鼠.实验组(n=10)和对照组(n=10)分别于小鼠左肾被膜上下级同时移植胰岛细胞250个和等体积的胰腺外分泌细胞,术后实验组按腹腔注射A1AT 83 mg/kg(28 d),对照组注射等量生理盐水(28 d),同时两组小鼠分别按0.5μg/g腹腔注射EDU(28 d).1个月后切除左肾,免疫组织化学染色法检测左肾包膜下抗淀粉酶抗体的表达,免疫荧光染色法检测移植胰岛β细胞增殖情况,并继续检测血糖.结果 (1)纯化胰岛组胰岛素含量为(1.53±0.33) μg/孔,实验组为(1.26±0.13) μg/孔,对照组为(0.82±0.24) μg/孔,各组间的差异均有统计学意义(P<0.01).纯化胰岛组胰蛋白酶浓度为(1.05±0.22) ng/ml,实验组为(2.42±0.44) n
作者:韩小乐;黎沙;夏小林;糜亮亮;周乐亮;田磊
来源:中华器官移植杂志 2015 年 36卷 2期