目的：观察经血红素加氧酶-1（HO-1）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSCs）在急性肾损伤（AKI）微环境下的增生分化，并探讨其机制。方法Gateway 技术构建含 HO-1目的基因的质粒，同时构建仅含示踪基因 eGFP 的对照载体；脂质体法转染293FT 细胞获得慢病毒原液 lenti-HO-1-eGFP 和 lenti-eGFP；稀释后分别感染 BMSCs 获得 HO-1-BMSCs 和 eGFP-BMSCs（空载体对照），检测转染细胞的活力、分化潜能。制作缺血再灌注诱导 AKI 大鼠的肾脏匀浆上清（AKI-KHS），以正常大鼠肾脏匀浆上清（N-KHS）作为对照，分别干预 BMSCs、eGFP-BMSCs 和 HO-1-BMSCs，构成空白组（BMSCs 组）、对照组（BMSCs／N-KHS 组）、BMSCs／AKI-KHS 组、eGFP-BMSCs／AKI-KHS 组和 HO-1-BMSCs／AKI-KHS 组，于37℃、5％ CO2培养箱中培养3 d。MTT 法检测培养 BMSCs 的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡，透射电镜观察细胞超微结构变化，免疫组化法检测细胞内角蛋白18（CK18）表达，Western 印迹对各组细胞内 HO-1、磷酸化丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（pAKT）、磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）水平进行检测。用 SPSS19．0统计软件进行统计学分析。结果基因修饰并未改变BMSCs 活力及多向分化潜能。与对照组比，BMSCs／AKI-KHS 组的细胞生长抑

作者：刘楠梅；王会玲；韩国锋；于秀峙；田军；胡伟锋；张金元

来源：中华肾病研究电子杂志 2015 年 4期