目的:观察补肾化瘀生新方对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在缺血缺氧微环境下生存率、凋亡率、活性氧水平的影响.方法:采用无血清的DMEM(dulbecco's modified eagle medium)培养基及低氧工作站,观察6 h、12 h、24 h、36 h、40 h、44 h、48 h、60 h 8个时间点各组BMSCs的生存率、凋亡率和氧化应激水平.CCK-8法检测细胞生存率(cell viability rate),流式细胞仪检测BMSCs凋亡率及细胞内ROS(reactive oxygen species)含量变化,倒置荧光显微镜观察胞内ROS荧光强度改变,以探究BMSCs缺血缺氧模型成功最佳时间点.继以补肾化瘀生新方含药血清干预BMSCs,测定其对缺血缺氧微环境的调控及细胞生存率、凋亡率的影响.结果:与正常组比较,缺血缺氧组随着时间增加生存率降低,凋亡率升高,40 h时BMSCs生存率最低、凋亡率最高(P<0.05),胞内ROS荧光表达增强,60 h细胞大量死亡(P<0.05);与缺血缺氧组比较,补肾化瘀生新方组BMSCs生存率明显提升,细胞凋亡率和胞内ROS表达下降(P<0.05).结论:BMSCs缺血缺氧模型建立成功的最佳时间点为40 h,补肾化瘀生新方可提高BMSCs在缺血缺氧微环境下的生存率,延缓细胞凋亡进程.
作者：王诗琦；惠小珊；张金生；袁书章；薛珂
来源：中国中医基础医学杂志 2021 年 27卷 8期
