目的 研究Toll样受体4(TLR4)基因小干扰RNA(siRNA)对体外缺氧复氧条件下诱导肾小管上皮细胞分泌TNF-α的抑制作用.方法 Wistar大鼠原代肾小管上皮细胞(PTECs)置于六孔培养板培养,随机分为A组(正常培养组)、B组(缺氧复氧+TLR4-siRNA转染组)、C组(缺氧复氧组)、D组(缺氧复氧+对照siRNA转染组)共4组.其中B组、C组和D组细胞缺氧3 h,随后复氧24 h,RT-PCR方法和Western blot检测TLR4 mRNA和蛋白表达情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况,ELISA方法检测各组上清液中TNF-α含量.结果 经缺氧复氧处理后,B组、C组和D组的TLH4mRNA、蛋白水平较A组均显著上调(P<0.01),各组上清液TNF-α含量较A组也显著升高(P<0 01):而B组TLR4mRNA、TLR4蛋白表达量和上清液TNF-α含量较C组和D组均显著下调(P<0 01);D组与C组相比,各项检测指标表达无显著变化(P>0 05).结论 针对TLR4 mRNA的sir-NA可以有效地抑制缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞的凋亡和炎症反应.
作者:刘秀娟;黄国明;丁仲如;涂晓文;余燕燕
来源:中华临床医师杂志(电子版) 2011 年 05卷 22期