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目的 研究微小RNA-134(miRNA-134)对人脑胶质瘤细胞系U87在侵袭、迁移方面的作用并探讨可能的作用机制.方法 通过人工合成miR-134 mimic瞬时转染脑胶质瘤细胞系U87,实时定量荧光聚合酶链式反应(PCR)检测细胞miR-134的表达水平;并通过四唑盐比色法(MTT)检测U87细胞增殖情况;Transwell小室法检测各组U87细胞株迁移和侵袭能力;实时定量荧光PCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测各组基质金属蛋白酶3(MMP-3)的表达水平.统计学数据处理采用SPSS 19.0软件处理,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05有统计学意思.结果 荧光显微镜下观察转染效率90%以上,实时定量荧光PCR结果显示与未处理的空白对照组(control)及空白转染组(Mock)比较,miR-134转染组的miR-134表达水平明显上调,可达到对照组的5~6倍(P<0.05);MTT实验结果表明miR-134转染组细胞增殖能力明显下降(P<0.05),同时Transwell实验也显示miR-134转染组细胞的迁移能力明显降低(P<0.05);实时定量荧光PCR及Western blot分析MMP-3表达情况发现,过表达miR-134可以明显减少MMP-3基因及蛋白的表达水平(P<0.05).结论 本研究表明miR-134能够抑制胶质瘤U87细胞的增殖及侵袭迁移能力,其机制可能与抑制MMP-3的表达有关,提示miR-134可能成为胶质瘤治疗的新靶点.

作者:袁野;杨涌杰;曲圣涛;赵正;关俊宏

来源:中华神经外科疾病研究杂志 2015 年 14卷 2期

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作者:
袁野;杨涌杰;曲圣涛;赵正;关俊宏
来源:
中华神经外科疾病研究杂志 2015 年 14卷 2期
标签:
微小RNA-134 胶质瘤 细胞增殖 细胞侵袭 基质金属蛋白酶3 MicroRNA-143 Glioma Cell proliferation Migration MMP-3
目的 研究微小RNA-134(miRNA-134)对人脑胶质瘤细胞系U87在侵袭、迁移方面的作用并探讨可能的作用机制.方法 通过人工合成miR-134 mimic瞬时转染脑胶质瘤细胞系U87,实时定量荧光聚合酶链式反应(PCR)检测细胞miR-134的表达水平;并通过四唑盐比色法(MTT)检测U87细胞增殖情况;Transwell小室法检测各组U87细胞株迁移和侵袭能力;实时定量荧光PCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测各组基质金属蛋白酶3(MMP-3)的表达水平.统计学数据处理采用SPSS 19.0软件处理,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05有统计学意思.结果 荧光显微镜下观察转染效率90%以上,实时定量荧光PCR结果显示与未处理的空白对照组(control)及空白转染组(Mock)比较,miR-134转染组的miR-134表达水平明显上调,可达到对照组的5~6倍(P<0.05);MTT实验结果表明miR-134转染组细胞增殖能力明显下降(P<0.05),同时Transwell实验也显示miR-134转染组细胞的迁移能力明显降低(P<0.05);实时定量荧光PCR及Western blot分析MMP-3表达情况发现,过表达miR-134可以明显减少MMP-3基因及蛋白的表达水平(P<0.05).结论 本研究表明miR-134能够抑制胶质瘤U87细胞的增殖及侵袭迁移能力,其机制可能与抑制MMP-3的表达有关,提示miR-134可能成为胶质瘤治疗的新靶点.