目的:探讨脑源性神经肽S(NPS)对大鼠鼻黏膜间充质干细胞(EMSCs)成骨及分化蛋白的影响。方法:取6周龄的雌性SD大鼠鼻黏膜行EMSCs培养，选用第4代EMSCs行相关实验。采用免疫荧光法检测EMSCs的表面标志物Nestin和Vimentin鉴定EMSCs。加入NPS与EMSCs共培养，并将EMSCs分为生理盐水组(对照组)、200 ng/ml NPS组、400 ng/ml NPS组。采用免疫荧光染色法观察NPS作用8 h后EMSCs的表达量，评估NPS对EMSCs增殖的影响。将EMSCs在成骨诱导培养基培养14 d，用以观察NPS对EMSCs成骨分化的影响：采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP的活性；采用茜素红S(ARS)染色法观察矿化水平；采用蛋白质免疫印迹法和免疫荧光染色法检测骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)、胶原蛋白Ⅰ(COL Ⅰ)、NPS受体(NPSR)及Runx-2的表达水平。结果:免疫荧光染色结果显示，鼻黏膜分离培养的细胞的Nestin和Vimentin均为阳性表达。免疫荧光结果表明，对照组、200 ng/ml NPS组及400 ng/ml NPS组Ki-67的阳性表达率差异无统计学意义( P>0.05)。ALP活性检测及ARS染色结果显示，200 ng/ml NPS组与400 ng/ml NPS组的ALP活性及钙结节表达量差异均无统计学意义(均 P>0.05)，但均高于对照组(均 P < 0.01)；蛋白质免疫印迹结果显示，200 ng/ml NPS组和

作者：周艳君；孟朋飞；崔萌；史文涛；鲁晓杰；赵鹏

来源：中华神经外科杂志 2022 年 38卷 11期