目的 初步探讨14-3-3β基因对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其作用机制. 方法 收集常规培养的SVGp12及U251、U87、SHG-44以及用14-3-3β特异性siRNA(14-3-3β-siRNA)沉默的U251细胞等各胶质瘤细胞株,应用实时定量PCR (RT-PCR)和Westernblotting检测各胶质瘤细胞中14-3-3β基因及蛋白表达情况.将常规培养生长至对数期的U251细胞分为实验组(14-3-3β-siRNA转染)、阴性对照组(对照siRNA转染)和空白对照组(未经任何转染),MTT法测定各组细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,RT-PCR检测细胞p53mRNA水平. 结果 与正常胶质细胞SVGp12相比,14-3-3β基因及蛋白在胶质瘤细胞中均呈现高表达,差异均有统计学意义(P＜0.05).与阴性对照组及空白对照组相比,实验组U251细胞14-3-3β基因及蛋白表达量明显降低,细胞增殖率明显下降,凋亡率显著增加,侵袭能力明显降低,p53mRNA水平显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 选择性沉默14-3-3β基因可有效抑制U251细胞的增殖及侵袭能力、促进其凋亡,这一过程主要是通过14-3-3β基因调控p53基因及其下游调控因子来实现的,表明14-3-3β基因可作为神经胶质瘤治疗药物研发的潜在靶点.
作者：公方和；叶景；李天栋；白红民；刘帅；王伟民；王国良
来源：中华神经医学杂志 2014 年 13卷 9期
