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目的 探讨缺氧对N9小胶质细胞CXCR4表达的影响及CXCR4在缺氧诱导的小胶质细胞运动迁移变化过程中的作用. 方法 将N9小胶质细胞置于常氧和缺氧(含1%O2)的环境中培养.提取细胞总RNA用实时定量PCR(PT-PCR)检测CXCR4mRNA的表达,Western blotting 检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及CXCR4的蛋白表达水平.采用siRNA沉默N9细胞HIF-1α或CXCR4后,再次检测缺氧对CXCR4表达的影响.用Transwell法检测常氧及缺氧条件下N9细胞的迁移运动能力,沉默CXCR4后,再次观察N9细胞的迁移运动能力. 结果 与生长在常氧环境中的N9细胞相比,生长在缺氧环境中的N9细胞的CXCR4表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);沉默HIF-1α可以抑制缺氧诱导的CXCR4的上调,与仅转染si-Control的细胞相比,差异有统计学意义(P<0.05);与常氧条件下培养的细胞相比,生长在缺氧条件下的N9细胞的迁移运动动力能力显著增强,前者穿膜细胞数为(20.33±2.08)个,后者穿膜细胞数为(63.00±5.57)个,差异有统计学意义(P<0.05);与仅转染si-Control的细胞相比,CXCR4沉默可以显著抑制N9细胞的运动迁移能力,前者穿膜细胞数为(63.00±4.00)个,后者的穿膜细胞数为(19.33±3.21)个,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 缺氧可以通过诱导N9小胶质细胞CXCR4的表达上升而促进

作者:种莉;唐鹏;刘鹏;陈丽;刘玥;李锐;郭民侠

来源:中华神经医学杂志 2014 年 13卷 11期

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作者:
种莉;唐鹏;刘鹏;陈丽;刘玥;李锐;郭民侠
来源:
中华神经医学杂志 2014 年 13卷 11期
标签:
小胶质细胞 缺氧 CXCR4 基因沉默 缺氧诱导因子-1α Microglia Hypoxia CXCR4 Gene silencing Hypoxia inducible factor-1α
目的 探讨缺氧对N9小胶质细胞CXCR4表达的影响及CXCR4在缺氧诱导的小胶质细胞运动迁移变化过程中的作用. 方法 将N9小胶质细胞置于常氧和缺氧(含1%O2)的环境中培养.提取细胞总RNA用实时定量PCR(PT-PCR)检测CXCR4mRNA的表达,Western blotting 检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及CXCR4的蛋白表达水平.采用siRNA沉默N9细胞HIF-1α或CXCR4后,再次检测缺氧对CXCR4表达的影响.用Transwell法检测常氧及缺氧条件下N9细胞的迁移运动能力,沉默CXCR4后,再次观察N9细胞的迁移运动能力. 结果 与生长在常氧环境中的N9细胞相比,生长在缺氧环境中的N9细胞的CXCR4表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);沉默HIF-1α可以抑制缺氧诱导的CXCR4的上调,与仅转染si-Control的细胞相比,差异有统计学意义(P<0.05);与常氧条件下培养的细胞相比,生长在缺氧条件下的N9细胞的迁移运动动力能力显著增强,前者穿膜细胞数为(20.33±2.08)个,后者穿膜细胞数为(63.00±5.57)个,差异有统计学意义(P<0.05);与仅转染si-Control的细胞相比,CXCR4沉默可以显著抑制N9细胞的运动迁移能力,前者穿膜细胞数为(63.00±4.00)个,后者的穿膜细胞数为(19.33±3.21)个,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 缺氧可以通过诱导N9小胶质细胞CXCR4的表达上升而促进