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目的 观察沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达后,对缺氧微环境下人胰腺癌BxPC-3细胞株生长、侵袭和凋亡功能的影响.方法 通过合成短链干扰RNA(siRNA)转染沉默BxPC-3细胞株中HIF-1α基因表达.将细胞分为空白对照组(BxPC-3)、空白质粒转染对照组(GFP)和HIF-1α基因沉默组(sh-HIF-1α),分别在正常环境(21.0% O2)和缺氧环境(0.5% ~1.0% O2)中培养48 h后,描绘各组细胞的生长曲线,并对细胞侵袭性和凋亡率进行检测比较.结果 缺氧培养后BxPC-3组和GFP组细胞中HIF-1αmRNA表达分别比正常环境中增加了78.4%和67.6%,相应的HIF-1α蛋白表达分别增加了7.1倍和6.2倍,明显高于sh-HIF-1α组(P<0.05).在缺氧环境下,sh-HIF-1 α组细胞生长速度慢于BxPC-3组和GFP组(P<0.05),其穿膜细胞数[(48.8±3.8)个/HP]也明显低于BxPC-3组[(118.0±6.8)个/HP]和GFP组[(116.3±6.4)个/HP,P<0.01].相反sh-HIF-1 α组细胞在缺氧环境中的凋亡率(20.6±1.3)%明显高于BxPC-3组(2.3±0.3)%和GFP组(2.8±0.9)%(P<0.01).结论 缺氧可以诱导HIF-1α高表达并提高BxPC-3细胞对缺氧应激的耐受能力,沉默HIF-1α基因表达后,BxPC-3细胞株对缺氧的耐受性显著下降,在缺氧环境中细胞的生长、侵袭能力降低,而缺氧诱导的细胞凋亡明显增加.

作者:蒋奕;吴国豪;何国栋;庄秋林;张波;韩寓嵩

来源:中华实验外科杂志 2012 年 29卷 10期

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作者:
蒋奕;吴国豪;何国栋;庄秋林;张波;韩寓嵩
来源:
中华实验外科杂志 2012 年 29卷 10期
标签:
基因沉默 缺氧诱导因子-1α 脱噬作用 糖酵解 Gene silencing Hypoxia inducible factor-1α Apoptosis Glycolysis
目的 观察沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达后,对缺氧微环境下人胰腺癌BxPC-3细胞株生长、侵袭和凋亡功能的影响.方法 通过合成短链干扰RNA(siRNA)转染沉默BxPC-3细胞株中HIF-1α基因表达.将细胞分为空白对照组(BxPC-3)、空白质粒转染对照组(GFP)和HIF-1α基因沉默组(sh-HIF-1α),分别在正常环境(21.0% O2)和缺氧环境(0.5% ~1.0% O2)中培养48 h后,描绘各组细胞的生长曲线,并对细胞侵袭性和凋亡率进行检测比较.结果 缺氧培养后BxPC-3组和GFP组细胞中HIF-1αmRNA表达分别比正常环境中增加了78.4%和67.6%,相应的HIF-1α蛋白表达分别增加了7.1倍和6.2倍,明显高于sh-HIF-1α组(P<0.05).在缺氧环境下,sh-HIF-1 α组细胞生长速度慢于BxPC-3组和GFP组(P<0.05),其穿膜细胞数[(48.8±3.8)个/HP]也明显低于BxPC-3组[(118.0±6.8)个/HP]和GFP组[(116.3±6.4)个/HP,P<0.01].相反sh-HIF-1 α组细胞在缺氧环境中的凋亡率(20.6±1.3)%明显高于BxPC-3组(2.3±0.3)%和GFP组(2.8±0.9)%(P<0.01).结论 缺氧可以诱导HIF-1α高表达并提高BxPC-3细胞对缺氧应激的耐受能力,沉默HIF-1α基因表达后,BxPC-3细胞株对缺氧的耐受性显著下降,在缺氧环境中细胞的生长、侵袭能力降低,而缺氧诱导的细胞凋亡明显增加.